浙江省自然科学基金(R2110231)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 三氧化二砷中间代谢产物二甲基亚砷酸（DMA^Ⅲ）与大鼠血红蛋白相互作用的分子机制研究被引量：4
- 2014年
- 为了研究三氧化二砷的中间代谢产物三价二甲基亚砷酸DMAIII与大鼠血红蛋白的作用位点及其机制,本研究将SD大鼠随机分成对照组和给药组,对照组单次经口给蒸馏水,给药组单次经口给予三价亚砷酸(iAsIII),分离大鼠血红细胞→溶血→获得血红蛋白。利用高效液相质谱(HPLC)联用结合电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)分析砷结合血红蛋白的化学形态。利用时间飞行质谱(LC/ESI-TOF-MS)分析DMAIII与血红蛋白结合位置,进一步采用分子对接(molecular docking)方法预测了DMAIII与血红蛋白的结合模式,从分子水平上分析了DMAIII与血红蛋白的作用机制。实验结果表明,砷以DMAIII与大鼠血红蛋白结合,主要结合位点为血红蛋白的alpha链螺旋的Cys13周围的氨基酸口袋,该位置使DMAIII更容易结合半胱氨酸,并阻止了DMAIII的游离。指出DMAIII与血红蛋白的高亲和力与Cys13周围的空间结构有直接关系。
- 张敏王文文金慧芳包凌玲那仁满都拉秦颖洁李春辉
- 关键词：血红蛋白
- 仓鼠经口给予亚砷酸盐后血浆中砷结合蛋白的纯化
- 2013年
- 目的:探索用凝胶过滤柱和阴离子交换柱,结合电感耦合等离子质谱仪分离纯化砷结合蛋白,为阐明砷的毒理机制提供技术支持。方法:通过HPLC-ICP-MS技术,采用KW-803色谱柱、凝胶过滤柱和离子交换柱分离纯化仓鼠血浆中的砷结合蛋白;SDS-PAGE凝胶电泳分析由HPLC-ICP-MS系统凝胶过滤柱和离子交换柱获得的每个蛋白样本。结果:①仓鼠单次经口给予三价亚砷酸(iAsⅢ)后,运用三步法即利用凝胶过滤、KW-803色谱柱和阴离子交换等色谱柱联用HPLC-ICP-MS,最后纯化得到了仓鼠血浆中砷结合蛋白;②SDS-PAGE凝胶电泳分析由HPLC-ICP-MS系统联用不同凝胶过滤柱和离子交换柱获得的每个蛋白样本,检测到砷结合蛋白分子量大约40～50 kD。结论:凝胶过滤柱和阴离子交换柱,结合电感耦合等离子质谱仪是分离纯化动物血浆或组织上清砷结合蛋白简便快速的方法。
- 王文文张敏李春辉秦颖洁那仁满都拉
- 关键词：亚砷酸盐类亚砷酸盐类亚砷酸盐类砷质谱分析法仓鼠
