国家自然科学基金(30972041C110602)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张兰威张莉丽韩雪杜明易华西更多>>
- 相关机构：哈尔滨工业大学东北农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省“十一五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学化学工程生物学更多>>
- 凝胶层析和离子交换层析结合法纯化高盐发酵液中谷氨酰胺转胺酶被引量：5
- 2012年
- 采用凝胶层析和离子交换层析相结合的方法分离纯化高盐培养基中的谷氨酰胺转胺酶,优化的凝胶层析的条件,上样量6 mL,流速为0.25 mL/min;离子交换层析的上样量50 mL,流速为3 mL/min。酶被纯化了4.22倍,比活力达17.33 U/mg蛋白,回收率为77.5%。液相色谱-串联质谱鉴定、蛋白质数据库比对结果表明,纯酶与AAN01353是同种蛋白质。
- 张莉丽张兰威杜明韩雪易华西张英春张艳禾马微
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶液相色谱-串联质谱凝胶层析离子交换层析
- 玉米谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2010年
- 从玉米嫩叶中提取总RNA,通过RT-PCR的方法扩增出玉米谷氨酰胺转胺酶(TGase)全长基因,回收目的片段并测序,该基因编码区全长1605bp,编码535个氨基酸残基,分子量为60.9kD,与GenBank(登录号:AJ421525)上已发表的序列同源性为100%。按正确的阅读框架将玉米TGase基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,1mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,经凝胶分析软件测得蛋白表达量约占总蛋白的15%,以His-Tag抗体作为一抗,采用Western-blot方法检测目的蛋白,结果证明所表达的特异蛋白是带有His-Tag的重组融合蛋白,利用Ni2+-NTA琼脂糖树脂亲和层析柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE鉴定为单一条带,测得纯化后的TGase酶活力达到16U/mg。
- 秦兰霞王利张兰威
- 关键词：大肠杆菌谷氨酰胺转胺酶酶活
- 微生物源谷氨酰胺转氨酶基因工程菌株的研究进展被引量：2
- 2013年
- 微生物源谷氨酰胺转氨酶(mTCase)是一种催化酰基转移反应的酶,它可以催化蛋白质分子内、分子间的交联,进行蛋白质翻译后修饰,从而改变蛋白质的功能特性,在食品、生物医学、纺织等领域有着广泛的应用前景.本文综述了构建产微生物源谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌株的相关技术、研究进展,并对未来研究方向提出建议。
- 李洪波张兰威崔艳华张莉丽
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶基因工程菌株蛋白表达
