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梓醇对TNF-α诱导的HAECs细胞损伤抑制作用的机制研究被引量：9: 2019年; 梓醇是从中药地黄的根中提取出的一种环烯醚萜葡萄糖苷类化合物,据报道有抗氧化应激作用。腺苷5'磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)在抑制氧化应激方面起到重要作用。该研究通过对氧化应激相关指标的检测探讨梓醇对TNF-α诱导的人主动脉内皮细胞(human aorta epithelial cells,HAECs)细胞损伤的抑制作用,通过siRNA技术检测其调控氧化应激与AMPK的关系。采用比色法测定细胞中SOD,MDA,GSH和LDH水平,流式细胞仪测定ROS生成水平。免疫印迹(Westernblot)法检测细胞中AMPK,磷酸化AMPK和NOX4的表达。RNA干扰技术敲低AMPK水平,通过再次检测各项指标探讨梓醇抑制氧化应激与其激活AMPK的相关性。结果表明,TNF-α诱导损伤的HAECs磷酸化AMPK表达下降,而梓醇上调AMPK的磷酸化水平。未转染AMPK siRNA前,梓醇能够抑制TNF-α诱导的NOX4蛋白表达上调,并减少ROS生成,AMPK siRNA作用后,梓醇对ROS过度生成、NOX4蛋白表达上调的抑制作用均减弱。以上结果提示,梓醇通过激活AMPK抑制细胞中氧化应激,进而抑制TNF-α诱导的HAECs细胞损伤。; 徐粲瑶张玉坤孙慧君张红; 关键词：梓醇 TNF-Α 自噬 AMPK

熊果酸抑制HepG2中C-反应蛋白的异常表达及其对HUVECs的损伤被引量：2: 2013年; 目的:研究不同剂量的熊果酸(UA)对IL-6诱导的HepG2细胞中C-反应蛋白(CRP)异常表达的抑制作用以及对CRP所致人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:IL-6(30ng/mL)、UA(6.5、12.5、25μmol/L)与IL-6(30ng/mL)共同作用于HepG2细胞48h,分别用MTT法、Western blot法及RT-PCR法检测各组细胞活力、CRP蛋白及mRNA表达情况。CRP(25μg/mL)、UA(5,10,20μmol/L)与CRP(25μg/mL)共同作用于HUVECs 24h,分别用MTT法、Western blot法及RT-PCR法检测各组细胞增殖、VCAM-1和LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果:UA能显著抑制IL-6诱导的HUVECs细胞活力下降及细胞中CRP蛋白与mRNA的表达升高;UA显著抑制CRP引起的内皮细胞增殖,并且在mRNA及蛋白水平均能显著抑制CRP诱导的HUVECs异常高表达VCAM-1及LOX-1。结论:UA可通过抑制肝脏合成炎症因子CRP而降低血液中CRP浓度,并降低CRP等炎症因子对内皮细胞的损伤等途径从而发挥抗心肌缺血及动脉粥样硬化等心血管疾病的作用。; 金越吕圆圆刘克辛韩国柱王长远刘琦孟强孙慧君; 关键词：熊果酸 HEPG2 人脐静脉血管内皮细胞 CRP

薯蓣皂苷通过上调Lrp5、β-catenin表达促进成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化被引量：11: 2013年; 目的探讨薯蓣皂苷对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响,并初步探讨薯蓣皂苷预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法①体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分别加入含不同浓度的薯蓣皂苷(0.3、0.6、1.2μmol·L-1)进行培养,以洛伐他汀(0.04μmol·L-1)作为阳性对照。采用MTT法检测细胞增殖情况;用ALP试剂盒检测细胞内ALP的活性;采用RT-PCR检测Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达情况;Von Kossa染色法检测细胞矿化能力。②通过RNAi技术将Lrp5基因沉默,检测薯蓣皂苷是否依赖于Lrp5来调节OPG/RANKL的比值。结果①薯蓣皂苷可以剂量依赖的促进MC3T3-E1细胞的增殖;②薯蓣皂苷可以剂量依赖的增加MC3T3-E1细胞ALP的活性;③薯蓣皂苷可以剂量依赖的上调MC3T3-E1细胞Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达水平;④薯蓣皂苷可以使MC3T3-E1细胞产生的矿化结节数增加;⑤薯蓣皂苷依赖于Lrp5来调节MC3T3-E1的OPG/RANKL比值。结论①适量浓度的薯蓣皂苷可以促进MC3T3-E1细胞的增殖与分化;②薯蓣皂苷可以调节Lrp5等与骨代谢相关的基因的表达以产生抗骨质疏松作用。; 张春芳吴珊彭金咏夏凡王长远刘琦孟强刘克辛孙慧君; 关键词：薯蓣皂苷 MC3T3-E1细胞 OPG 增殖分化

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国家自然科学基金(81273508)