国家自然科学基金(81071059)
- 作品数：26 被引量：83H指数：5
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- 丙泊酚后处理对氧糖剥夺胎鼠海马神经元ADAR2-AMPA受体GluR2通路的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨丙泊酚后处理对氧糖剥夺胎鼠海马神经元腺苷脱氨酶（ADAR2）-α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）受体GluR2通路的影响.方法 原代培养孕16- 18 d Wistar大鼠胎鼠海马神经元7d,采用随机数字表法分为3组（n=6）：对照组（C组）、氧糖剥夺组（O组）和丙泊酚后处理组（P组）.C组正常培养;O组缺氧、缺糖1h后复糖、复氧;P组缺氧、缺糖1h后复糖、复氧即刻加入丙泊酚1.2 μg/ml孵育2h,随后更换正常培养液进行培养.于培养24 h时收集细胞,采用MTT法检测海马神经元存活情况,采用RT-PCR法检测ADAR2mRNA的表达,Western blot法检测总ADAR2蛋白（tADAR2）及胞核ADAR2蛋白（nADAR2）的表达,巢式RT-PCR和特异性限制性内切酶BbV1法检测ADAR2受体GluR2 mRNA Q/R位点编辑比例.结果 3组海马神经元ADAR2mRNA及总ADAR2蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;与C组比较,O组海马神经元存活率下降,胞核ADAR2蛋白表达下调,海马神经元胞核ADAR2/总ADAR2蛋白比值下降,GluR2 mRNA Q/R位点编辑比例下降（P＜0.05）;与O组比较,P组海马神经元存活率上升,胞核ADAR2蛋白表达上调,海马神经元胞核ADAR2/总ADAR2蛋白比值升高,GluR2 mRNA Q/R位点编辑比例升高（P＜0.05）.结论 丙泊酚后处理可通过激活ADAR2-AMPA受体GluR2通路减轻胎鼠氧糖剥夺海马神经元损伤.
- 朱敏王海云傅巍王国林苏心王琼
- 关键词：二异丙酚后处理
- 异氟醚/丙泊酚不同配伍对大鼠海马神经元缺氧损伤时GABAA受体α1亚基稳态的影响被引量：8
- 2017年
- 目的评价异氟醚/丙泊酚不同配伍对大鼠海马神经元缺氧损伤时GABAA受体（GABAAR）α1亚基稳态的影响。
方法原代培养Wistar大鼠胎鼠海马神经元，采用随机数字表法将神经元分为6组（n＝60）：正常对照组（C组）、缺氧组（H组）、异氟醚组（I组）、丙泊酚组（P组）、异氟醚/丙泊酚不同配伍组（IP1组和IP2组）。H组缺氧6 h；I组和P组缺氧6 h后分别经1.9 %异氟醚和22.4 μmol/L丙泊酚孵育3 h；IP1组和IP2组缺氧6 h后分别经1.0%异氟醚＋6.7 μmol/L丙泊酚、1.4 %异氟醚＋3.4 μmol/L丙泊酚孵育3 h；随后更换正常培养基培养。培养24 h时采用CCK-8法检测细胞活力，采用qPCR法检测GABAAR α1亚基mRNA的表达，采用Western blot法检测胞膜GABAAR α1亚基的表达，采用免疫沉淀和Western blot法检测GABAAR α1亚基内质网相关降解（ERAD）水平，采用免疫荧光检测CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的表达。
结果与C组比较，其余5组神经元活力降低，GABAAR α1亚基mRNA和胞膜GABAAR α1亚基表达下调，CHOP表达上调，GABAAR α1亚基ERAD水平升高（P〈0.05）。与H组比较，I组、P组和IP2组神经元活力降低，GABAAR α1亚基mRNA和胞膜GABAAR α1亚基表达下调，CHOP表达上调，GABAAR α1亚基ERAD水平升高（P〈0.05），IP1组上述指标差异无统计学意义（P〉0.05）；与I组或P组比较，IP1组和IP2组神经元活力升高，GABAAR α1亚基mRNA和胞膜GABAAR α1亚基表达上调，CHOP表达下调，GABAAR α1亚基ERAD水平降低（P〈0.05）。与IP1组比较，IP2组神经元活力降低，GABAAR α1亚基mRNA和胞膜GABAAR α1亚基表达下调，CHOP表达上调，GABAAR α1亚基ERAD水平升高（P〈0.05）。
结论1.0%异氟醚＋6.7 μmol/L丙泊酚配伍时不加重缺氧诱导的大鼠海马神经元GABAAR α1亚基稳态破坏。
- 王海云郭娣王欣悦王国林
- 关键词：异氟醚受体GABA-A
- 丙泊酚对大鼠脑胶质瘤侵袭力的影响被引量：5
- 2017年
- 目的评价丙泊酚对大鼠脑胶质瘤侵袭力的影响。
方法健康成年雄性Wistar大鼠120只，体重250～280 g，采用随机数字表法分为4组（n＝30）：假手术组（S组）不接种C6胶质瘤细胞，只做颅骨钻孔；胶质瘤成瘤组（G组）接种C6胶质瘤细胞，建立脑胶质瘤模型；丙泊酚不同剂量组（P1组和P2组）于脑胶质瘤建模后第10天静脉输注丙泊酚20 mg·kg－1·h－1（P1组）和40 mg·kg1·h－1（P2组），输注时间6 h。于建模后第18天，断头取全脑，剥离瘤体，称量胶质瘤重量，并观察病理学结果；采用免疫组化染色测定胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性表达情况；采用Western blot法及免疫荧光法分别测定胶质瘤边缘区及核心区内血管内皮生长因子（VEGF）表达。
结果S组未见胶质瘤形成。G组、P1组和P2组肿瘤中心有明显空洞及缺血坏死区，肿瘤边缘胶质瘤细胞及新生血管分布密集，大部分肿瘤细胞GFAP呈阳性表达。与S组比较，G组、P1组和P2组VEGF表达上调，阳性细胞数升高（P〈0.05）。与G组比较，P1组和P2组胶质瘤重量降低，VEGF表达下调，阳性细胞数降低（P〈0.05）；P1组和P2组上述指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。
结论丙泊酚可抑制大鼠脑胶质瘤侵袭力，具有抗肿瘤作用。
- 杨陈祎王海云王欣悦武毅王国林
- 关键词：二异丙酚神经胶质瘤肿瘤侵润
- 七氟醚麻醉对老龄大鼠海马含GluR2亚基的AMPA受体转运的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨七氟醚麻醉对老龄大鼠海马含GluR2亚基的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）受体转运的影响.方法 健康雄性老龄Wistar大鼠68只,18 ～ 20月龄,体重600 ～ 650g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=34）：对照组（C组）和七氟醚组（S组）.S组行开放性胫骨骨折手术,吸入3.6％七氟醚2h进行麻醉.于术后1、3、7d进行场景恐惧记忆实验、声音提示恐惧记忆实验和Y迷宫实验,采用Western blot法测定海马总蛋白及膜蛋白含GluR2亚基的AMPA受体表达,并计算膜蛋白与总蛋白该受体表达水平的比值（m/t比值）.结果 与C组相比,S组术后1和3d场景恐惧记忆实验僵直时间百分比和自发交替百分比降低,海马膜蛋白含GluR2亚基的AMPA受体表达下调,m/t比值降低,术后1-7 d声音提示恐惧记忆实验僵直时间百分比降低（P＜0.05）.结论 七氟醚麻醉诱发老龄大鼠术后学习记忆功能障碍的机制与促进海马含GluR2亚基的AMPA受体从胞膜向胞浆转运有关.
- 王苗苗郭东勇杨美华胡南王超李依泽王海云王国林
- 关键词：蛋白质转运海马
- 海马PKMζ/KCC2通路在异丙酚后处理对脑缺血再灌注大鼠长时程脑保护效应中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨海马蛋白激酶Mζ（PKMζ）/钾离子-氯离子共转运体2（KCC2）通路在异丙酚后处理对脑缺血再灌注大鼠长时程脑保护效应中的作用.方法 成年雄性SD大鼠60只,体重250～ 280 g,采用随机数字表法分为5组（n=12）：假手术组（S组）、脑缺血再灌注组（I/R组）和异丙酚后处理组（P组）、PKMζ抑制剂ZIP＋脑缺血再灌注组（Z＋I/R组）和ZIP＋异丙酚后处理组（Z＋P组）.采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注损伤模型.P组和Z＋P组于再灌注即刻静脉输注异丙酚20 mg·kg-1·h-12h,I/R组和Z＋I/R组给予等容量生理盐水2h.Z＋P组和Z＋I/R组于再灌注前15 min分别静脉注射ZIP 0.5μmol/L.于再灌注28 d时行改良神经行为学评分（mNSS评分）.行为学测试结束后,取海马组织,采用免疫荧光染色法计数CA1区GABA中间神经元GAD67/KCC2阳性神经元,采用Western blot法测定海马PKMζ和磷酸化KCC2（p-KCC2）的表达水平.结果 与S组比较,I/R组、P组和Z＋P组mNSS评分升高,海马GAD67/KCC2阳性神经元计数降低,PKMζ和p-KCC2表达下调（P＜0.05）;与I/R组比较,P组mNSS评分降低,海马GAD67/KCC2阳性神经元计数升高,PKMζ和p-KCC2表达上调,Z＋I/R组mNSS评分升高,海马GAD67/KCC2阳性神经元计数降低,PKMζ和p-KCC2表达下调（P＜0.05）;与P组比较,Z＋P组mNSS评分升高,海马GAD67/KCC2阳性神经元计数降低,PKMζ和p-KCC2表达下调（P＜0.05）.结论 异丙酚后处理对脑缺血再灌注大鼠长时程脑保护效应的机制可能与激活海马PKMζ/ KCC2通路有关.
- 刘书颖王海云王国林王红柏朱敏
- 关键词：二异丙酚缺血后处理协同转运子海马
- 右美托咪定对大鼠海马神经元缺氧损伤时胞膜含NR1亚基的NMDA受体和含GluR2亚基的AMPA受体表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的 评价右美托咪定对大鼠海马神经元缺氧损伤时胞膜含NR1亚基的NMDA受体和含GluR2亚基的AMPA受体表达的影响.方法 原代培养出生24h内的健康Wistar大鼠的海马神经元,接种于培养板中,采用随机数字表法分为3组（n=24）：对照组（C组）、缺氧组（H组）和右美托咪定组（D组）.H组和D组采用缺氧6h的方法制备神经元缺氧损伤模型;D组缺氧6h时加入0.1μmol/L右美托咪定孵育3h,随后更换正常培养基进行培养24h.采用CCK-8法检测神经元活力,检测LDH漏出率,Western blot法检测胞膜含NR1亚基的NMDA受体和含GluR2亚基的AMPA受体的表达水平,Fluo-3AM法检测胞浆钙离子浓度.结果 与C组比较,H组和D组神经元活力降低,LDH漏出率升高,胞膜含NR1亚基的NMDA受体表达上调,含GluR2亚基的AMPA受体表达下调,胞浆钙离子浓度升高（P＜0.05）;与H组比较,D组神经元活力升高,LDH漏出率降低,胞膜含NR1亚基的NMDA受体表达下调,含GluR2亚基的AMPA受体表达上调,胞浆钙离子浓度降低（P＜0.05）.结论 右美托咪定减轻大鼠海马神经元缺氧损伤的机制可能与抑制胞膜含NR1亚基的NM-DA受体表达上调和含GluR2亚基的AMPA受体表达下调有关.
- 李艳丽李唐王海云华伟杨陈祎陈一萌
- 关键词：缺氧神经元受体N-甲基-D-天冬氨酸受体AMPA
- 异丙酚后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响：长期观察被引量：5
- 2012年
- 目的评价异丙酚后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响：长期观察。方法健康雄性sD大鼠144只，体重250～280g，7—8周龄，采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=36）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）、异丙酚后处理组（P组）和溶媒对照组（I组）。I／R组、P组和I组采用线栓法阻塞大脑中动脉60min进行再灌注的方法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。P组在再灌注即刻开始静脉输注异丙酚20Ⅱ1g·kg^-1·h^-1 2h，S组和I／R组给予等容量生理盐水，I组给予等容量10％脂肪乳。4组分别于术后1、14、28d取5只大鼠，进行神经功能评分及脑梗死体积测定；4组各取6只大鼠，分别于术后9、23d开始进行Morris水迷宫测试，连续6d；4组分别于术后1、14、28d取5只大鼠，取海马组织，测定使君子酸（AMPA）受体GIuR1亚基及其在胞膜上表达水平，计算二者比值（胞膜GIuR1亚基／GIuR1亚基）。结果与s组比较，I／R组神经功能评分和跨越平台次数降低，脑梗死体积增加，逃避潜伏期延长，胞膜GIuR1亚基／GIuR1亚基增加（P〈0．05），而海马组织GIuR1亚基表达差异无统计学意义（P〉0．05）；异丙酚后处理可抑制脑缺血再灌注诱导的上述改变（P〈0．05）。结论异丙酚后处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效应可连续到术后28d，其部分机制与抑制含GIuR1亚基AMPA受体向细胞膜转运有关。
- 文志廷王国林王海云李翠罗猛强
- 关键词：二异丙酚再灌注损伤
- 异氟醚／丙泊酚不同配伍麻醉对轻度认知功能障碍大鼠术后认知功能的影响被引量：8
- 2016年
- 目的评价异氟醚／丙泊酚不同配伍麻醉对轻度认知功能障碍（MCI）大鼠术后认知功能的影响。方法健康雄性Wistar大鼠，16～18月龄，采用结扎双侧颈总动脉致其重度狭窄的方法，建立MCI模型。取MCI模型制备成功的大鼠150只，采用随机数字表法分为5组（n=30）：假手术组（S组）、异氟醚组（I组）、丙泊酚组（P组）和异氟醚／丙泊酚不同剂量配伍组（IP1,2组）。I组吸入1．9％异氟醚；P组静脉输注丙泊酚40mg·kg-1·h-1；IP1组吸入1．0％异氟醚，静脉输注丙泊酚20mg·kg-1·h-1；IP，组吸入1．4％异氟醚，静脉输注丙泊酚10mg·kg-1·h-1。各组麻醉时间均为3h，待大鼠翻正反射消失后行胫骨骨折切开复位内固定术。于术后7d行恐惧条件化测试与Y迷宫实验检测认知功能，取海马组织，尼氏染色确定海马CA1区存活神经元计数；免疫荧光法确定海马CA1区CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）及cflspase-12阳性神经元计数。结果与s组比较，IP2组、I组和P组N臂停留时间比率、僵直时间比率和存活神经元计数降低，CHOP阳性神经元计数和caspase-12阳性神经元计数升高（P〈0．05），IP1组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与IP1组比较，IP2组、I组和P组N臂停留时间比率、测试期僵直时间比率和存活神经元计数降低，CHOP阳性神经元计数和caspase-12阳性神经元计数升高（P〈0．05）；与IP2组比较，I组和P组N臂停留时间比率、测试期僵直时间比率和存活神经元计数降低，CHOP阳性神经元计数和caspase-12阳性神经元计数升高（P〈0．05）。结论1．0％异氟醚复合丙泊酚20mg·kg-1·h-1麻醉不加重MCI大鼠术后认知功能障碍。
- 郭娣王海云李唐陈一萌王国林
- 关键词：二异丙酚异氟醚手术后并发症
- 异丙酚后处理对大鼠海马氧糖缺失/复氧复糖时 CA1区神经元突触传递的影响
- 2014年
- 目的：评价异丙酚后处理对大鼠海马氧糖缺失/复氧复糖（OGD/R ）时CA1区神经元突触传递的影响。方法雄性Wistar大鼠，15～20日龄，体重50～60 g ，快速断头取脑组织，制备350μm厚的海马脑片，采用随机数字表法，将其分为3组（ n＝12）：对照组（C组）置于正常人工脑脊液中培养7 min＋1 h；OGD/R组置于持续通以95％ N2的无糖人工脑脊液中孵育7 min ，然后放入正常人工脑脊液中孵育1 h；异丙酚后处理组（P组）置于持续通以95％ N2的无糖人工脑脊液中孵育7 min ，然后放入含异丙酚浓度为1.2μg/ml的人工脑脊液中孵育1 h。采用全细胞膜片钳技术记录CA1区神经元自发兴奋性突触后电流（sEPSC ）和自发抑制性突触后电流（sIPSC ）的强度和频率。结果与C组相比， OGD/R组和P组sEPSC的强度和频率升高，sIPSC的强度和频率降低（ P＜0.05）；与OGD/R组相比，P组sEPSC的强度和频率降低，sIPSC的强度和频率升高（ P＜0.05）。结论异丙酚后处理减轻大鼠海马OGD/R损伤的机制与其抑制CA1区神经元兴奋性突触传递和增强抑制性突触传递有关。
- 朱爱王海云王国林杨卓张涛杨佳佳
- 关键词：二异丙酚缺血后处理突触传递海马神经元
- 压力控制通气模式在合并轻度阻塞性通气功能障碍老年患者腹腔镜胆囊手术中的通气效果被引量：11
- 2016年
- 目的评价压力控制通气(PCV)模式用于合并轻度阻塞性通气功能障碍的老年患者行腹腔镜胆囊切除术中的通气效果。方法选择择期拟行腹腔镜胆囊切除术患者40例,男23例,女17例,年龄65~75岁,ASAⅡ或Ⅲ级,合并轻度阻塞性通气功能障碍,BMI 18.5~23.9kg/m^2,采用随机数字表法,均分为两组:容量控制通气(VCV)组(V组)和PCV组(P组)。新鲜气流量均为2L/min,FiO_260%,VT_8~12ml/kg(P组调整吸气压),I∶E 1∶2,RR 12~16次/分。调整通气参数维持PET_CO2 35~45mm Hg。直至手术结束后气管导管拔除期间两组均分别维持以上通气模式及呼吸参数。于气管插管后5min(气腹前)(T_1)、气腹开始后30min(T_2)、气腹结束后10min(T_3)时记录气道峰压(Ppeak)、气道平台压(Pplat)、吸气阻力(Raw)和动态肺顺应性(Cdyn),采集桡动脉和混合静脉血行血气分析,计算氧合指数(PaO_2/FiO_2)、呼吸指数(RI)、死腔通气率(VD/VT_)和肺内分流率(Qs/Qt)。记录拔管时间、复苏室停留时间和拔管后2h内高碳酸血症、低氧血症等不良反应的发生情况。结果与V组比较,T_1~T_3时P组Ppeak、Pplat和Raw明显降低,Cdyn、PaO_2/FiO_2明显升高,RI、VD/VT_、Qs/Qt和拔管后低氧血症发生率明显降低(P<0.05)。两组拔管时间、复苏室停留时间及高碳酸血症发生率差异无统计学意义。结论 PCV模式可安全用于合并轻度阻塞性通气功能障碍的老年腹腔镜胆囊切除术患者,其通气效果好,低氧血症发生率降低。
- 赵振宇文志廷王海云张景洪邢金城刘艳茹叶政辉
- 关键词：老年患者气道阻力肺顺应性
