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国家重点基础研究发展计划(2010CB933904): 作品数：30 被引量：157H指数：6; 相关作者：张英鸽孙岚贾培媛王玉霞武军华更多>>; 相关机构：军事医学科学院中国人民解放军总医院吉林大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程理学一般工业技术更多>>

膨化脱毒处理后蓖麻籽粕中蓖麻毒素的检测被引量：1: 2013年; 目的检测膨化脱毒蓖麻籽粕中的残余毒素。方法蓖麻籽粕经过粉碎、匀浆及离心后得到匀浆上清,应用酶联免疫吸附分析(ELISA)、免疫印迹、金标免疫层析试纸检测蓖麻籽粕在PBST匀浆上清中的蓖麻毒素;应用细胞生长抑制实验测定蓖麻籽粕在生理盐水匀浆上清的细胞毒性。结果经双夹心ELISA检测蓖麻原粕匀浆含有较高浓度的蓖麻毒素,达到0.25 mg/g;对细胞生长有明显的抑制作用;应用蓖麻毒素检测试纸显示强阳性条带。应用试纸条检测经加热膨化处理后的样品只显示微弱条带。ELISA检测结果表明加热膨化处理后蓖麻籽粕中的毒素含量明显下降,脱毒率达到99%以上。加热膨化处理后样品的匀浆上清在高浓度时对细胞生长仍有一定抑制作用,但与原粕比较细胞毒性明显下降;应用免疫印迹检测蓖麻籽粕结果与ELISA和细胞实验结果一致。结论本研究将ELISA、免疫印迹和免疫层析试纸相结合,建立了有效检测蓖麻籽粕中残余蓖麻毒素的方法,为蓖麻籽粕脱毒处理样品的质量检测及其应用提供了实验依据。; 武军华李倩董娜王玉霞贾培媛梁晓赵元忠; 关键词：蓖麻毒素酶联免疫吸附分析免疫印迹

7种植物多糖对小鼠卵清蛋白免疫反应的佐剂活性(英文)被引量：14: 2013年; 目的寻找和筛选具有较好佐剂功能的天然多糖。方法自中药提取当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、茯苓多糖、黄精多糖、枸杞多糖和淫羊藿多糖。苯酚硫酸法测总糖含量;间羟联苯法分析糖醛酸含量;凝胶渗透色谱法测定多糖分子量分布。按照分组,每只BALB/c小鼠肌内注射60μg卵清蛋白(OVA),OVA+0.1mg氢氧化铝,OVA+1mg多糖,OVA+生理盐水,并分别在第1,28和58天进行3次注射,在第21,52,70天采血,测定血清OVA抗体滴度。结果 7种多糖中的总糖含量为板蓝根总糖,65.41%;当归总糖,30.88%;黄芪总糖,43.70%;黄精总糖,48.88%;茯苓总糖,58.68%;枸杞总糖,45.83%;淫羊藿总糖,32.60%;总糖中糖醛酸含量为板蓝根糖醛酸,13.36%;当归糖醛酸,19.73%;黄芪糖醛酸,6.53%;黄精糖醛酸,5.96%;茯苓糖醛酸,1.96%;枸杞糖醛酸,8.96%;淫羊藿糖醛酸,7.53%。7种多糖表现出不同的分子质量分布特征。初次免疫,7种多糖和铝佐剂均未激活小鼠血清OVA抗体产生;在第2次免疫后,淫羊藿多糖佐剂组产生较高滴度的抗体,达到1:105;第3次免疫后淫羊藿多糖佐剂组抗体滴度进一步提高,板蓝根多糖、当归多糖及茯苓多糖佐剂组的OVA特异性抗体滴度均达到1:105,与OVA+0.1mg氢氧化铝及OVA+生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)。结论板蓝根多糖、当归多糖、茯苓多糖及淫羊藿多糖均具有很好的佐剂作用,特别是淫羊藿多糖具有较强的激发体液免疫活性。多糖有望成为候选的新型免疫佐剂。; 董娜张贵强贾培媛武军华李帅单俊杰王玉霞; 关键词：免疫佐剂

HI-6对梭曼染毒大鼠膈肌胆碱酯酶的重活化作用: 2011年; 目的研究HI-6对膈肌局部梭曼染毒大鼠膈肌胆碱酯酶的重活化作用。方法将大鼠麻醉后固定,沿腹正中线切开腹腔,暴露膈肌。梭曼局部染毒膈肌1和10 min后,局部或全身给予HI-6,于给药后24和72 h处死大鼠,取出中毒部位膈肌,用硫胆碱酶法显示终板的AChE活性,观察HI-6对胆碱酯酶的重活化作用。结果膈肌局部梭曼中毒1和10 min后,局部给予HI-6 24和72 h对局部中毒膈肌胆碱酯酶均没有重活化作用,在光镜下观察不到棕褐色椭圆形的运动终板;而膈肌局部梭曼中毒1和10 min后,全身给予HI-6对局部中毒膈肌胆碱酯酶有明显的重活化作用,在光镜下可见到肌纤维上又出现了棕褐色椭圆形的运动终板。结论HI-6全身给药对早期膈肌局部中毒的神经运动终板胆碱酯酶有重活化作用。; 孙岚刘艳芹宋东颖蔡要欣刘岩磊王伊文赵德禄张英鸽; 关键词：HI-6 胆碱酯酶梭曼

射频消融对消融灶边缘肿瘤细胞生长的影响: 2013年; 目的探讨射频消融(radiofrequency ablation,RFA)在体外细胞实验中对消融灶边缘残余肿瘤细胞生长的影响。方法使用锥虫蓝染色法观察不同温度和时间RFA作用后HCT116细胞的生长情况,以及不同温度RFA作用后消融灶边缘HCT116细胞在不同时间点的生长情况;利用流式细胞仪检测不同温度RFA后24 h消融灶边缘HCT116细胞的凋亡率。结果 RFA后,HCT116细胞从射频中心向外依次形成凝固性坏死区域、水泡样变条带和未发生明显变化的区域。随着作用温度的升高和作用时间的延长,锥虫蓝的蓝染区域扩大,蓝染区域周围出现细胞脱落带。85℃、70℃和55℃RFA后24 h,消融灶周围残余HCT116细胞的凋亡率分别为(18.34±0.94)%、(10.89±0.77)%和(11.90±1.33)%,均明显高于空白对照组(2.45±0.09)%(P<0.01)。85℃组细胞的凋亡率显著高于70℃组和55℃组(P<0.05)。结论体外实验发现,RFA可对肿瘤细胞产生进行性损伤,同时可促进消融灶周围残余肿瘤细胞凋亡。; 李月廷聂辰潘微彤良良尹占霞王丽兴蒲韵竹赵宝全; 关键词：射频消融细胞增殖细胞凋亡

蓖麻毒素细胞毒性及其中毒小鼠组织病理改变被引量：6: 2013年; 目的探讨蓖麻毒素对不同细胞的细胞毒性及小鼠各主要组织脏器毒性的基本病理改变。方法应用MTT法检测不同浓度(1 ng/ml,10 ng/ml,100 ng/ml,1μg/ml)蓖麻毒素给药24 h对不同细胞株(Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2,H1299)的细胞活性的影响;经灌胃方式使小鼠中毒,中毒24 h观察蓖麻毒素对小鼠脏器的基本病理变化,测定相关生化指标,分析蓖麻毒素对小鼠肝肾损伤。结果不同浓度的蓖麻毒素对Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2和H1299细胞均有一定的毒性,随着毒素浓度的升高,细胞毒性亦呈上升趋势,有明显量效关系,其中MDCK细胞对蓖麻毒素最为敏感。病理学检测显示蓖麻毒素可致小鼠肾小球出血及部分肾血管内皮细胞缺如,肝细胞水肿、近端肠绒毛损伤、轻度坏死性肺炎并有炎性细胞浸润。血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、甘油三酯(TG)、肌酐(CREA)均升高,表明小鼠中毒3 h内肝功能和肾功能已出现一定程度的损伤。结论蓖麻毒素通过抑制蛋白质合成而导致细胞坏死。不同细胞对蓖麻毒素具有不同的敏感性,表现为蓖麻毒素中毒早期,动物即可出现严重的肝、肾损伤。; 董娜武军华贾培媛李倩温新宇冯泽国周建平王玉霞; 关键词：蓖麻毒素细胞毒性病理改变

淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂作用被引量：18: 2013年; 目的研究探讨淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂活性。方法淫羊藿多糖G1和G4,生理盐水分别与流感病毒裂解疫苗配伍免疫小鼠,初次免疫后2周收集小鼠血清,ELISA法检测血清中抗体的滴度;MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应;ELISA测定IFN-γ和IL-4的水平,流式细胞术测定脾淋巴细胞CD4+、CD8+、CD3+和CD19+亚群。结果初次免疫后,淫羊藿多糖G1和G4能显著提高免疫小鼠血清的抗体滴度;能明显增强脾T淋巴细胞的增殖反应,可以显著提高脾淋巴细胞CD4+、CD8+和CD3+的含量及CD3+/CD19+的比值,诱导分泌IFN-γ的水平升高。结论淫羊藿多糖可增强小鼠对H1N1的免疫应答,可以作为甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的一种新型免疫佐剂。; 董娜李倩张贵强贾培媛武军华单俊杰王玉霞; 关键词：淫羊藿多糖甲型H1N1流感病毒裂解疫苗免疫佐剂

竞争性ELISA方法检测小鼠血清中的P53蛋白被引量：2: 2011年; 目的建立动物组织内P53蛋白的免疫检测分析方法,为P53生物药物的代谢分布研究提供检测手段。方法辣根过氧化物酶(HRP)标记抗P53蛋白单克隆抗体3P40,应用标记后的抗体及重组P53蛋白的检测,建立竞争性ELISA检测方法;应用此方法建立血清样品中P53蛋白标准曲线,测定腹腔注射P53后不同时间小鼠血清中P53浓度。结果利用亲和层析纯化的3P40,进行HRP标记,ELISA检测3P40HRP滴度可达1∶200 000;建立的竞争性ELISA方法可以检测PBST中P53蛋白,灵敏度达30 ng/ml,日内精密度较高,相对标准偏差(RSD)小于5%,体现较好的重复性;分别应用正常小鼠血清、PBST稀释的重组P53蛋白样品进行竞争性ELISA检测,结果显示小鼠血清成分对P53蛋白检测有一定的影响;应用血清制备P53蛋白的标准曲线,检测了腹腔注射P53蛋白后不同时间点小鼠血清样品中的P53蛋白浓度。结论进行了抗P53单克隆抗体3P40的HRP标记,建立了竞争性ELISA方法,可用于P53蛋白药物血药浓度检测。; 武军华魏文清贾培媛王晨宇赵宇刘晶黄春倩王玉霞; 关键词：P53蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附分析

碳纳米材料生物毒性的检测方法与技术被引量：1: 2013年; 随着纳米科技的发展，纳米材料成为生物医药领域中的研究热点，作为靶向治疗抗肿瘤药物载体、医学诊断造影剂、抗菌药物，纳米材料均体现出良好的应用前景，人们对碳纳米材料的生物安全性也更加关注。利用准确快速的方法、技术对碳纳米材料的生物毒性进行分析与评价，对研究碳纳米材料的毒理学效应、作用机制及新型药物的筛选与研发具有重要意义。本文从生物化学和分子、离体细胞、整体动物3个水平对目前常用的检测方法进行综述。; 刘岩张英鸽孙岚姚红娟; 关键词：碳纳米材料生物毒性

金黄色葡萄球菌肠毒素A检测方法的建立及其应用（英文）被引量：1: 2018年; 目的建立一种敏感、特异、便捷的方法,用于检测食源性金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)。方法采用经典的细胞融合技术制备抗SEA的单克隆抗体,亲和层析纯化抗体蛋白,ELISA方法测定抗体滴度,免疫层析分析抗体亚型。以抗SEA单抗为一抗,建立Western印迹法,检测不同食物样品中的SEA。结果筛选出3株抗SEA的单抗,命名为SEA-7,SEA-18和SEA-86。纯化后的3株单抗纯度均>90%,抗体滴度均在1∶32 000,经鉴定均为IgG1亚型。利用3株单抗建立检测SEA的Western印迹法,SEA-7的检测灵敏度最高,可达1.56 ng。以SEA-7为一抗,可检测出不同食物中污染的SEA,如污染了1.56 ng SEA的水,污染了5 ng SEA的粥或火腿肠匀浆。结论建立的检测SEA方法可靠灵敏,可用于监测食源性金黄色葡萄球菌污染。; 李倩武军华高珊高珊魏文青王玉霞; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素A 单克隆抗体毒素检测

纳米药物释放系统在肿瘤组织中增强的透过与滞留效应及其影响因素被引量：6: 2015年; 增强的透过与滞留(EPR)效应是纳米药物递送系统(NDDS)对肿瘤组织靶向性的生物学基础。肿瘤血管和淋巴系统结构功能与正常组织之间的差异是EPR效应产生的根本原因。NDDS载体的粒径、形态及表面理化性质、系统对肿瘤组织的血流灌注和肿瘤组织微生化环境是肿瘤组织中EPR效应的主要影响因素。通过对载体粒径和形态的选择和表面理化性质的设计,提高系统对肿瘤组织的血液灌注及改变肿瘤组织微环境,可以实现对EPR效应的人为调节,提高NDDS对肿瘤组织的选择性,充分发挥EPR效应在肿瘤靶向治疗中的作用。本文对NDDS在肿瘤组织中的EPR效应原理及影响因素等进行综述。; 李劲草孙岚姜爽刘岩姚红娟蒲韵竹朱静雨张英鸽; 关键词：肿瘤

国家重点基础研究发展计划(2010CB933904)

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