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聚乙二醇细胞融合技术在牛手工体细胞克隆中的应用初探被引量：1: 2008年; 本研究分3个实验。实验1对比了不同浓度的离子霉素对牛去透明带卵母细胞孤雌激活的效果;实验2比较了手工半卵切割法去核与显微半卵切割法去核的效果;实验3对聚乙二醇(PEG)细胞融合技术在牛手工体细胞克隆的应用进行了初步探讨。结果表明,对于去透明带牛卵母细胞孤雌激活,离子霉素浓度为2.0μmol/L组的激活效果最好,其囊胚发育率(29.4%)极显著地高于浓度为5.0μmol/L的对照组和0.5μmol/L组(囊胚率分别为8.3%和9.4%,P<0.01);采用半卵切割法去核,手工切割的半卵存活率(85.6%)与显微操作(90.3%)差异不大,切割速率(约100枚卵/h)相仿。对双半卵与体细胞进行同步融合处理时,应用50%浓度的PEG融合率(39.3%)极显著好于45%、55%和60%的PEG(融合率分别为0%、16.2%和5.3%,P<0.01)。; 谭世俭田国富谢忠君刘继龙石德顺; 关键词：聚乙二醇细胞融合体细胞克隆

牛体细胞核移植胚胎的批量化生产被引量：7: 2007年; 利用2枚显微去核后的半卵与1枚供体细胞同步融合,并结合微穴法(WOWs)培养体系批量化生产成年牛克隆胚胎(日产40～80枚).结果,重构胚电融合率95.7%(3059/3197)、卵裂率87.1%(2637/3027)、囊胚率41.1%(1244/3027)和可冻胚率(72.5%,933/1244)均达到较高水平.克隆胚胎采用玻璃微管玻璃化冷冻保存数月后移植,30日龄时妊娠率为28.1%(48/171),已经产下5头足月克隆牛续.结果表明,该方法具有产业开发潜力.; 谭世俭QIANLing-mei石德顺; 关键词：体细胞核移植玻璃化冷冻胚胎移植

一氧化氮对动物胚胎发育的影响研究进展: 2008年; 一氧化氮(NO)属于无机自由基气体,作为一种特殊的生物传递信号分子,日益受到生命科学各领域的普遍重视。机体内的NO是由三种一氧化氮合酶合成的,是动物体内发挥多种生物学效应的自由基,是一种重要的生物信使,它几乎对哺乳动物的所有系统都会产生一定的作用。近几年的研究结果表明了NO对动物胚胎发育也发挥着重要影响。本文着重介绍NO对动物胚胎发育和附植过程的影响。; 刘继龙谭世俭黄雅琼; 关键词：一氧化氮胚胎发育

猪卵母细胞孤雌激活的初步研究被引量：1: 2006年; 对不同浓度离子霉素以及不同质量(A类或混合类)的猪卵丘细胞-卵母细胞复合体(COC s)对卵孤雌发育的效果影响进行了初步研究。结果表明:(1)A类猪COC s孤雌激活后的囊胚发育率极显著的高于混合类(30.11%vs 9.09%,P<0.01);(2)采用化学方法激活体外成熟后的猪去透明带卵母细胞,离子霉素浓度为5μm o l/L组激活后得到的卵裂率(80.35%),以及激活后48 h发育到4细胞阶段的孤雌胚胎率(62.50%)均极显著高于浓度2μm o l/L组(分别为62.22%和43.33%,P<0.01)。; 刘继龙田国富谭世俭石德顺; 关键词：卵母细胞孤雌激活

血清添加时间及胚胎培养模式对产业化生产牛胚胎的影响被引量：1: 2005年; 在利用体外受精技术产业化生产牛胚胎的体系中,体外受精卵一开始就培养在已加入犊牛血清(FBS)的改良SOF液的实验组,其卵裂率(80.6%,253/314)和可冷冻胚胎率(20.8%,129/620)与在体外受精(IVF)3 d后才往胚胎培养体系中加入FBS的结果差异不显著(相应为83.4%,262/314和24.4%,151/620,P>0.05);而囊胚率差异显著(分别为41.8%,259/620和48.5%,301/620,P<0.05)。在IVF后第3天将培养体系中的未受精卵及发育迟缓的2-细胞阶段胚胎剔除与否的不同胚胎培养模式对其后囊胚的产量和质量均无显著影响。; 谭世俭; 关键词：犊牛血清牛胚胎体外生产

徒手切割法体细胞克隆研究进展被引量：2: 2006年; 体细胞核移植技术目前主要局限性是需要显微操作仪以及相关设备,并且对技术人员也有较高要求。徒手切割法体细胞克隆(HM C)技术不需要显微操作,且对技术人员要求也不高,是一项手工化的核移植技术,对今后核移植技术的研究以及产业化的发展具有一定的推动作用。; 田国富谭世俭李希; 关键词：核移植透明带卵母细胞

去透明带体细胞核移植的牛囊胚质量检测: 2007年; 对来自6批次147枚采用去透明带-双半卵融合法（简称去透明带法）克隆的牛体细胞囊胚进行质量分级，然后除了20枚优质胚胎用来移植外，其余的127枚克隆囊胚均采用低渗分离细胞核法进行细胞计数。结果表明：127枚采用去透明带法克隆的7d囊胚细胞数平均为129．8个，其中优质大囊胚细胞数平均为218．9士45．0个（117～281），中等大小的优质囊胚细胞数为134．9±43．7个（85～233），不同体积大小的囊胚细胞数差异极显著（P〈0．01）。结果表明，从优质囊胚比例以及其细胞数来衡量，采用去透明带克隆方法可以获得质量较高的牛囊胚。; 谭世俭; 关键词：体细胞克隆囊胚细胞计数

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