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上海市青年科技启明星计划(04QMX1455)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
卢艳
胡薇
黄成玉
王玮
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相关机构:
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发文基金:
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2007
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日本血吸虫弹性蛋白酶基因的克隆、表达及虫期特异性转录
被引量:3
2007年
目的克隆和表达日本血吸虫弹性蛋白酶基因(SjCE-2b),纯化表达重组蛋白,并研究该基因在各虫期的转录情况。方法预测SjCE-2b基因的编码序列。绘制血吸虫尾蚴弹性蛋白酶家族成员系统进化树。用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析SjCE-2b基因在日本血吸虫各期转录的差异。将RT-PCR扩增得到的SjCE-2b基因亚克隆至载体pET28b,在大肠埃希菌中诱导表达得到重组蛋白rSjCE-2b,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物,Western blotting分析其免疫原性。结果在虫卵、子胞蚴和成虫检测到SjCE-2b基因转录本(714bp),表达的重组蛋白rSjCE-2b,相对分子质量约为Mr 31000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符。构建了重组原核表达载体SjCE-2b/pET28b,并在大肠埃希菌中表达。纯化后的重组蛋白rSjCE-2b可被日本血吸虫感染的兔血清识别。结论在日本血吸虫虫卵、子胞蚴和成虫发现SjCE-2b基因转录本。SjCE-2b基因有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。
黄成玉
卢艳
王玮
鞠川
冯正
杨忠
王升跃
胡薇
关键词:
日本血吸虫
原核表达
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