国家重点基础研究发展计划(2010CB126502)
- 作品数：20 被引量：148H指数：7
- 相关作者：彭桂香谭志远杨芳杨盼盼田俊岭更多>>
- 相关机构：华南农业大学华中农业大学广西大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 光合细菌的分离与特性研究被引量：1
- 2012年
- 从华南农业大学水田土壤中经过富集培养和分离筛选,得到4株光合细菌,编号为B1～B4。采用不同培养条件对菌株进行了菌株生长和色素合成情况的观察检测,结果表明,以3 000 lx为最优生长光照强度,以厌氧+光照为促进光合色素合成的最佳组合条件。通过对菌株B2的菌落形态、培养特征、菌体形态学观察及生理生化特性测定,初步鉴定其为胶状红长命菌(Rubrivivax gelatinosus),该菌株发酵液对茄子、辣椒的促生作用已初有效果。
- 张茜彭桂香杨芳谭志远李永涛蔡燕飞
- 关键词：光合细菌生理生化特性
- 光合细菌sbg11培养条件的优化及施用于生菜上的效果被引量：8
- 2012年
- sbg11是从华南农业大学水田土壤中经过富集培养和分离筛选得到的光合细菌菌株。对光合细菌菌株sbg11的培养条件进行优化,并对盆栽生菜的施用效果进行测定。结果表明,光合细菌sbg11发酵时的最佳碳源和最佳氮源分别为乙酸钠和黄豆粉,初始发酵pH值为7.0,温度为30℃,最佳接种量为10%。光合细菌sbg11能显著提高生菜中氮、磷、钾、Vc、叶绿素的含量以及硝酸还原酶活性,对生菜产量和可溶性糖含量影响不大。
- 彭桂香张茜杨芳田俊岭杨盼盼蔡燕飞刘庆昌谭志远
- 关键词：光合细菌生菜
- 生物絮凝高活性菌株筛选及发酵优化被引量：4
- 2014年
- 【目的】从种植野生稻的稻田土壤中分离筛选对环境无污染、具有高效生物絮凝活性的菌株.【方法】采用VM培养基从药用野生稻中分离135个菌株,以发酵液对高岭土悬液絮凝效果为指标,筛选到絮凝活性高的菌株YH39.【结果和结论】16S rDNA序列分析表明,该菌株与越南伯克霍尔德菌Burkholderia vietnamiensis有98.6%的相似性.YH39产絮凝剂最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为硝酸钾.发酵动力学研究表明,菌株YH39发酵培养16 h,菌体浓度和絮凝活性达到最高值.对絮凝剂成分分析表明,絮凝剂为多糖,具有很好的耐热性,在60℃下加热30min,絮凝活性不改变.应用研究结果表明,此絮凝剂对3种印染废水均有很好的絮凝效果,不仅可以高效地降低废水的CODCr,还有很好的脱色效果.
- 彭桂香卢秋雁孔慧清李雄万涛卢钰升谭志远
- 关键词：微生物絮凝剂絮凝活性菌株筛选发酵优化
- 细菌生理特性快速检测试剂盒研制被引量：4
- 2011年
- 选取各代谢途径中利用某些特定碳源,如蔗糖、葡萄糖、甘露醇等95种碳源作为测试碳源,分别加入96孔酶标板中。选用指示剂噻唑兰(MTT)来鉴定细菌利用特征碳源情况。同时选取不同种类和不同浓度的抗生素,不同起始pH、不同NaCl浓度加入96孔酶标板中,测定细胞是否生长,可以快速地获得该菌的抗生素耐受性谱。试验还从指示剂浓度、培养基的固化、接菌浓度、观察时间等方面对试剂盒进行优化,得到一种最佳的试剂盒鉴定系统BiobiqA(碳源利用谱)和BiobiqB(生理抗性谱)。用模式菌株对试剂盒进行测试和验证,结果表明,试剂盒具有操作简便、结果准确、节省成本、节约时间等优点,可以进行细菌生理特性的快速检测。
- 彭桂香张武谭卫军谭志远
- 关键词：试剂盒细菌鉴定
- 利用细菌双杂交文库筛选华癸中慢生根瘤菌7653R中与外膜蛋白Opa22互作的蛋白被引量：6
- 2014年
- 为研究华癸中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)7653R外膜蛋白Opa22在共生固氮过程中的作用机制,构建了细菌双杂交基因组随机文库,并以Opa22为诱饵,钓取与其相互作用的候选靶蛋白。结果获得12个与Opa22蛋白互作的阳性克隆,为后续研究Opa22的作用机制提供了新的线索和思路,同时也为开展根瘤菌蛋白互作的研究构筑了良好的技术平台。
- 李一星李芳周鑫兰谢福莉李友国
- 关键词：共生固氮
- Sinorhizobium fredii WGF03胞外多糖分泌相关基因exoD功能初探被引量：3
- 2014年
- 从费氏中华根瘤菌WGF03的基因组中克隆出与胞外多糖分泌密切相关的基因exoD,研究该基因对胞外多糖合成、菌株共生结瘤能力和固氮效率的影响。利用自杀性质粒pK18mobsacB,通过同源双交换法构建exoD基因的缺失突变体ΔexoD。实验发现:与野生菌株相比,突变株在YMA培养基平板上胞外多糖产量明显减少、运动能力也有所减弱;在NaCl浓度小于350 mmol/L范围内,菌体均能维持稳定生长;接种于大豆幼苗后,产生的根瘤数量较多,但个体小、形状不一,且固氮酶活也显著下降。研究结果说明exoD基因参与S.fredii WGF03胞外多糖的合成并影响菌株共生结瘤能力和固氮效率。
- 马婷婷张健粟月萍宋张杨唐咸来申佩弘武波
- 关键词：胞外多糖突变
- 青香茅和五节芒内生固氮菌的分离与生理生化鉴定被引量：23
- 2013年
- 为研究青香茅(Cymbopogon caesius)和五节芒(Miscanthus floridulus)内生固氮菌的多样性,基于两种无氮培养基结合乙炔还原法从这两种牧草中分别分离到30株和36株菌.采用SDS-PAGE(Dodecyl sulfate sodium saltpolyacrylamide gel electrophoresis)全细胞蛋白电泳和IS-PCR(Insertion sequence-based PCR)指纹图谱将这66株内生固氮菌聚类为10个类群(I-X,每群3株以上,共61个聚群菌株)和3个未归类小组(共5个未聚群菌株).从10个聚类群和3个未归类小组中各选1株菌作为代表进行16S rDNA序列分析,发现它们与洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、固氮植物菌(Phytobacter diazotrophicus)、阿氏肠杆菌(Enterobacter asburiae)、织片草螺菌(Herbaspirillum seropedicae)、阪崎克洛诺菌(Cronobacter sakazakii)、水稻肠杆菌(Enterobacter oryzae)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、溶解肠杆菌(Enterobacter dissolvens)、无乳固氮螺螺(Azospirillum amazonense)、都柏林克罗诺杆菌(Cronobacter dublinensis)等的相似性分别达97%以上,表明所分离内生固氮菌多样性高.进一步对它们进行生理生化测定,结果表明有些菌株具泌氨能力、产吲哚、解磷、解钾效果,在农业生产上具有一定的应用潜力.
- 谭志远傅琴梅彭桂香原红娟程艳波江院
- 关键词：乙炔还原法内生固氮菌固氮酶活性微生物多样性五节芒
- 一株转化反式茴香脑产茴香酸菌株的筛选鉴定被引量：6
- 2016年
- 经过梯度驯化及富集筛选,从环境样品中分离获得348株能以反式茴香脑为唯一碳源的菌株。通过薄层层析法和反相高效液相法对转化液中的残余反式茴香脑和茴香酸进行定量分析,最后得到一株对反式茴香脑耐受能力和茴香酸产量都较高菌株WGBF9。在含体积分数为10%的反式茴香脑的种子培养基中,菌体的生物量为空白对照的37.42%,在含体积分数为20%反式茴香脑时,生物量也能达到空白对照的26.57%,说明WGBF9对反式茴香脑具有很高的耐受能力。将该菌株接种到复筛培养基中,30℃、转速200r/min的条件下发酵36h,茴香酸的摩尔生成率为17.9%。经形态学观察、生理生化等实验分析,初步鉴定WGBF9为恶臭假单胞菌A类变种(Pseudomonas putida biotype A)中的一个亚种。
- 王辛艳申佩弘华燕飞李俊芳张敏武波
- 关键词：恶臭假单胞菌茴香酸
- 费氏中华根瘤菌15142的cysDN基因克隆及其相关功能被引量：3
- 2011年
- 为确定cysDN操纵子的功能及对根瘤菌结瘤的影响，通过三亲本接合，将质粒转座子pTnMod-RKm′随机插入费氏中华根瘤菌15142中，建成随机插入突变体库，随后通过含有不同硫源的MM培养基的筛选得到一株不能利用硫酸盐但能够利用半胱氨酸的突变体. 进一步克隆和测序分析后发现该操纵子与已报道的Sinorhizobium sp. strain BR816的cysDN在核苷酸水平上有92%的相似性，在氨基酸水平上有96%的相似性. 用自杀质粒pK18mob分别构建含有cysD部分片段和cysN部分片段的重组质粒，通过三亲本接合导入出发菌株15142中，经过同源单交换，分别获得cysD的pK18mob正反向插入突变株cysDF/15142 以及cysDR/15142和cysN的pK18mob正反向插入突变株cysNF/15142与cysNR/15142. 用广谱宿主质粒pLAFRJ载体连接完整操纵子cysDN构建互补质粒cysDN＋pLAFRJ，将该质粒通过三亲本接合导入突变株中，获得互补菌株. 用不同硫源的液体MM培养基培养，发现互补菌株能够补回突变菌株不能利用硫酸盐作为唯一硫源的缺陷，说明cysDN操纵子确实与硫酸盐同化途径有关；植株试验表明突变株比出发菌株推迟结瘤1-2 d，固氮酶活也比出发菌株稍低；竞争结瘤试验表明突变菌株占瘤率较差，但在平均瘤数、平均瘤重、平均植株干重上则无差异. 图3 表4
- 张武田润申佩弘蒋承建许兢李俊芳武波
- 关键词：费氏中华根瘤菌基因克隆
- 百脉根离子通道蛋白Pollux与翻译延伸因子EF1A的相互作用被引量：4
- 2012年
- 利用酵母双杂交技术,以百脉根离子通道蛋白Pollux胞内结构域为诱饵,从百脉根AD-cDNA文库中筛选到与Pollux相互作用的多个阳性克隆,经DNA序列测定及NCBI数据库BLAST分析,其中有6个阳性克隆编码翻译延伸因子EF1A。进一步在大肠杆菌中表达与纯化Pollux和EF1A融合蛋白,通过Pull-down及Western杂交证实Pollux胞内结构域与EF1A的C-末端相互作用。
- 代广中袁兆栋苟洪兰方庆朱辉张忠明
- 关键词：百脉根酵母双杂交
