福建省属公益类科研院所基本科研专项(2009R10035-6)
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
- 相关作者：葛均青林天龙龚晖杨金先杨振慧更多>>
- 相关机构：福建省农业科学院福建师范大学福建农林大学更多>>
- 发文基金：福建省属公益类科研院所基本科研专项福建省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鳗鲡疱疹病毒ORF51基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：5
- 2014年
- 将鳗鲡疱疹病毒(AngHV)福建株(AngHV-FJ)ORF51基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-2中,构建表达质粒pGEX-4T-2-ORF51,将其转化至表达菌株E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导后,收集表达菌体,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹试验验证,结果表明,获得了高效表达的AngHV-FJ ORF51融合蛋白.经割胶回收纯化,获得高纯度的融合表达蛋白.用纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的兔抗ORF51多克隆抗体.这为进一步研究ORF51蛋白的结构和功能及开展AngHV病的防治研究提供了重要的研究基础.
- 李友娟郭凤达葛均青林天龙
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 鳗鲡疱疹病毒的分离与鉴定被引量：15
- 2014年
- 为获知鳗鲡"脱粘败血病"与病毒的关系,实验用蔗糖密度梯度离心的方法从发病的欧洲鳗鲡内脏器官组织匀浆液中纯化了病毒粒子,负染后利用电镜观察;进一步用EO细胞对病毒进行了分离、培养,并对感染病毒的细胞进行超薄切片,电镜观察;然后,提取病毒DNA,利用鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法对其进行了鉴定。结果显示,接种匀浆上清液的EO细胞出现细胞融合的病变效应;分离病毒的病毒粒子具囊膜,大小约为200 nm;从感染病毒的细胞上清液DNA中扩增出特异性条带,序列测定与比对分析表明,该序列与鳗鲡疱疹病毒欧洲株(AngHV-1)的序列完全一致。研究表明,利用EO细胞分离了一株鳗鲡病毒,经形态观察和DNA分析,确认该病毒为鳗鲡疱疹病毒,命名为AngHV-FJ。该研究为深入开展鳗鲡疱疹病毒的致病机制及鳗鲡"脱粘败血病"的防控研究奠定了重要基础。
- 葛均青杨金先龚晖林天龙
- 关键词：欧洲鳗鲡
- 鲤春病毒血症病毒基质蛋白基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)基因组序列(GenBank:NC_002803),人工合成M基因开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化工程菌株BL21(DE3),在0.1 mmol.L-1 IPTG、37℃下诱导5 h,获得高效表达的M蛋白,但其主要以包涵体的形式存在,经超声破碎、包涵体纯化后,再经Ni亲和层析柱纯化,获得高纯度的M蛋白.以纯化的M蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备了M蛋白的多克隆抗血清.ELISA检测显示抗血清的效价达1∶128000;western blot分析显示抗血清能够识别SVCV的M蛋白,表明其具有较好的灵敏性和特异性.
- 杨振慧葛均青刘荭杨金先郑晓聪林天龙
- 关键词：鲤春病毒血症病毒原核表达多克隆抗体
- 弹状病毒基质蛋白(Matrix protein)的研究进展被引量：1
- 2011年
- 弹状病毒的基因组由1段线性单股不分节的负链RNA组成,主要编码5个结构蛋白,分别为核蛋白(Nucleoprotein,N)、磷蛋白(Phosphoprotein,P)、基质蛋白(Matrix protein,M)、糖蛋白(Glycoprotein,G)和RNA聚合酶(RNA polymerase,L)。其中,基质蛋白(M)是一种多功能性蛋白,在病毒的侵染过程中参与病毒粒子的出芽、装配,抑制核质运输,调控宿主的基因转录,诱导细胞凋亡等。本文综述M蛋白的研究进展。
- 杨振慧葛均青龚晖林天龙
- 关键词：弹状病毒基质蛋白
