济南市高校院所自主创新计划项目(201004027)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 相关作者：何洪彬王洪梅武建明杨慧婷仲跻峰更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东师范大学东北农业大学更多>>
- 发文基金：济南市高校院所自主创新计划项目山东省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 位点特异整合酶φC31的作用机制及应用被引量：1
- 2012年
- 链霉菌噬菌体φC31整合酶是一种位点特异整合酶(Site-specific recombinase,SSR),其能够精确并单向的促进attP位点与attB位点的重组,是继Cre/Loxp、FLP之后又一个倍受关注的位点特异整合酶,该整合酶已经成为基因治疗、转基因研究等领域的常用技术手段。现对φC31位点特异性整合酶的作用机制、整合位点及其在转基因和基因治疗中的应用进行了综述,并对其发展前景进行了展望。
- 上官陶朱其军孙涛李光鹏仲跻峰何洪彬
- 关键词：ΦC31整合酶转基因基因治疗
- 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)(1354-1802)的原核表达及抗血清制备
- 2012年
- [目的]制备人组织型纤溶酶原激活剂t-PA(1354-1802)抗血清,并测定其效价,为深入研究t-PA基因功能奠定基础。[方法]利用基因克隆技术获得t-PA(1354-1802)催化域基因片段,然后将其重组到pET-32a(+)质粒中,进行鉴定及序列分析;将测序正确的阳性质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导、蛋白纯化及免疫兔试验。[结果]SDS-PAGE结果显示,37 kD处出现特异性条带;对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备t-PA蛋白抗血清,Western blot分析表明,抗血清可与标准品t-PA蛋白特异性结合,间接ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶12 800。[结论]成功制备了t-PA(1354-1802)抗血清,为t-PA基因功能的深入研究奠定了基础。
- 王青泉武建明李秀梅王立群何洪彬王洪梅刘晓
- 关键词：T-PA原核表达抗血清
- fat-1转基因动物研究进展被引量：3
- 2012年
- 转染秀丽隐杆线虫fat-1基因后的哺乳动物具备了将n-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)转化为n-3 PUFAs的能力,可降低动物机体的n-6/n-3 PUFAs比例。n-3 PUFAs有益于人类健康,可减少多种相关疾病发生的风险,但人体内不能合成n-3 PUFAs,其必须依赖于富含n-3 PUFAs的食品,fat-1转基因动物将成为人类必需的n-3 PUFAs的重要来源。对fat-1及其转基因动物的研究现状进行综述。
- 杨慧婷王洪梅方永志刘文浩武建明何洪彬
- 动物乳腺生物反应器研究进展被引量：2
- 2011年
- 介绍了动物乳腺生物反应器的优点,论述了其研究及应用概况,并对其发展趋势进行了展望。
- 杨慧婷王洪梅侯明海高运东仲跻峰何洪彬
- 关键词：转基因乳腺生物反应器动物
- 牛整合素β6基因的原核表达及其抗血清的制备研究被引量：1
- 2011年
- [目的]为深入研究ITGB6亚基的基因功能奠定基础。[方法]利用基因克隆技术获得整合素β6基因(ITGB6)胞外区,然后将其重组到pET-32a(+)质粒中,经鉴定及序列分析确定获得了重组阳性克隆;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导及蛋白纯化。[结果]SDS-PAGE结果显示,在94 kD处出现特异性条带;对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备ITGB6蛋白抗血清,Western-blot分析表明抗血清可与原核表达的ITGB6蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶2 560。[结论]成功表达了牛的重组整合素β6基因。
- 吕洋陈莉莉王洪梅武建明何洪彬李杰
- 关键词：原核表达抗血清
