吉林省科技厅资助项目(20060219)
- 作品数:3 被引量:11H指数:2
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- 发文基金:国家高技术研究发展计划吉林省科技厅资助项目更多>>
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- 牛凝乳酶基因的克隆与表达被引量:3
- 2008年
- 为了获得大量高纯度高活性的凝乳酶制剂,采用基因工程方法,从犊牛皱胃黏膜细胞中克隆得到凝乳酶基因,然后将此基因插入原核表达载体pTWlN1中,使之与几丁质结合域(CBD)一内含肽(intein)融合,从而获得原核表达质粒pTWIN1/EchybF2。经转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下进行凝乳酶的表达。SDS-PAGE电泳分析和酶活性实验结果显示,CBD-intein-EchybF2融合蛋白在BL21(DE3)中获得高效表达,在低温诱导时主要以可溶性蛋白的形式存在,并具有凝乳活性。
- 王景会姜媛媛李启云张莉徐波李达杨贞耐
- 关键词:克隆
- 微小毛霉凝乳酶基因的克隆与表达被引量:6
- 2010年
- 微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶是微生物凝乳酶的主要来源之一,但与传统的牛凝乳酶比较具有一定的缺陷。为将其采用基因工程的方法进行改造获得理想的凝乳酶,本研究克隆到微小毛霉凝乳酶基因,将其插入原核表达载体pTWlN1中,使之与几丁质结合域(CBD)一内含肽(intein)融合,获得原核表达质粒pTWIN1/M。转化大肠杆菌BL21(DE3),后经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳分析,获得了重组蛋白。
- 姜媛媛王景会李玉秋李达杨贞耐
- 关键词:微小毛霉克隆
- 干酪加工专用凝乳酶及其基因工程酶的研究被引量:2
- 2009年
- 凝乳酶是干酪加工中必须用到的酶制剂。本文详细的介绍了凝乳酶的结构,凝乳酶的不同来源,凝乳机理以及影响凝乳酶活性的因素等内容,并阐述了基因工程凝乳酶的研究现状及凝乳酶的发展前景,为解决我国凝乳酶的短缺问题提供思路。
- 徐波张莉王景会姜媛媛杨贞耐
- 关键词:凝乳酶干酪基因工程