国家科技支撑计划(2006BAK02A14)
- 作品数:3 被引量:36H指数:2
- 相关作者:史贤明张利达刘斌向雪菲张春秀更多>>
- 相关机构:上海交通大学国家工程研究中心更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程更多>>
- 食品中沙门氏菌分子检测靶点的筛选与评价被引量:18
- 2008年
- 【目的】发掘新的沙门氏菌分子检测靶点,筛选检测性能优秀的引物。【方法】利用BLAST程序比较沙门氏菌属内基因组DNA序列的同源性以及沙门氏菌与非沙门氏菌基因组DNA序列之间的特异性,发掘出100多个检测沙门氏菌属的特异性片段,并从中随机挑选出15个片段作为候选靶点,一共设计了27对引物(FS1~FS27),对它们的特异性、灵敏度加以评价,从中筛选检测性能最好的引物。【结果】在27对引物中,检测性能最优的引物为FS23,采用该引物对供试菌株的相应检测靶点进行PCR扩增,44株沙门氏菌都能扩增到一条492bp特异性片段,而22株非沙门氏菌则不能扩增出这一特异性片段。以FS23为引物建立PCR方法检测猪霍乱沙门氏菌基因组DNA的灵敏度为11.9fg/μL,细菌纯培养物灵敏度为4.9×102cfu/mL;用猪霍乱沙门氏菌人工污染牛奶样品,如果接种起始菌量为100cfu/25mL时,只需要增菌5h,采用上述方法即能检测出沙门氏菌。【结论】引物FS23对应的基因序列是一个性能优良的新分子检测靶点,具备很高的特异性和灵敏性,能够广泛应用于食品中沙门氏菌的快速检测。
- 向雪菲刘斌张利达史贤明
- 关键词:沙门氏菌PCR靶点
- 食品中病原生物芯片检测技术及设备的研究开发被引量:1
- 2014年
- 1课题目标
通过课题的研究,建立一系列食源性微生物高通量、快速检测方法,开发相应检测试剂和仪器设备,实现对组群样品和多种目标的同时快速准确检测,一次全面分析检测食品中所存在的微生物的种类、分布及数量,为保障食品安全和食品流通提供技术服务和支撑。
- 关键词:食品流通生物芯片病原检测试剂
- 基于单碱基延伸标签反应的常见食源性致病菌基因芯片检测方法的建立被引量:17
- 2009年
- 针对8种常见的食源性致病菌(金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、志贺氏菌、肠出血性大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲杆菌),建立了基于单碱基延伸标签反应原理的基因芯片检测方法。筛选和整合8种食源性致病菌基因组中的特异性序列和相应PCR引物,致病菌靶DNA片段被扩增和纯化作为单碱基延伸标签反应的模板,反应产物在DNA芯片上与探针进行杂交反应,然后通过扫描基片的荧光强度进行判断。实验结果表明,可采用基于单碱基延伸标签反应的基因芯片方法同时特异性检测8种食源性致病菌,基因组DNA多重检测灵敏度可达到0.1pg,以鼠伤寒沙门氏菌为单一检测对象的细菌纯培养物灵敏度可达到5×102CFU/mL。本方法可以快速灵敏地检测食源性致病菌,为食源性疾病的诊断和防治提供了一个有效的方法。
- 陆长勇施春雷张春秀陈婧史贤明
- 关键词:食源性致病菌基因芯片