海南省自然科学基金(30111)
- 作品数：10 被引量：92H指数：6
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- 相关机构：海南大学福建农林大学复旦大学更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 透明质酸产生菌SH-2发酵条件的优化被引量：3
- 2005年
- 对经紫外诱变,筛选出的突变菌株马疫链球菌SH-2,进行发酵条件的优化实验,通过单因素实验确定最佳摇瓶条件是种龄14-16h,初始pH7.6,发酵温度37℃,发酵时间44h;通过多因素正交实验摸索出营养培养基的最佳配比为:葡萄糖5%,酵母粉6.67%,牛肉膏3.33%,MgSO4·7H2O0.1%,MnSO4·4H2O0.02%,NaHCO30.3%,Na2HPO40.15%,NaCl0.3%,UTP0.05%,异甘草素0.08‰。
- 冯建成张容鹄罗素兰
- 关键词：发酵条件
- 海南海口地区甘蔗蚜虫种类的调查被引量：9
- 2003年
- 于 2 0 0 1年 5月至 2 0 0 2年 5月对海南海口地区甘蔗植株的蚜虫种类进行了调查 ,发现危害海口地区甘蔗的蚜虫主要是甘蔗绵蚜 (CeratovacunalanigeraZehntner) .这对甘蔗蚜虫的防治和培育抗蚜虫的甘蔗品种具有重要指导意义 .
- 罗素兰赵顺旺长孙东亭
- 关键词：甘蔗绵蚜蚜虫种类虫害防治
- 辣椒蚜虫种类的调查被引量：17
- 2003年
- 蚜虫属同翅目蚜虫总科 ,是重要的作物害虫。调查海南辣椒植株的蚜虫种类 ,采集蚜虫标本。将上述活体蚜虫分别接种在室内盆栽辣椒植株上饲养、繁殖 ,并观察记录各龄期蚜虫的形态特征。经室内观察测定 ,鉴定出三种蚜虫 :棉蚜[Aphisgossypii (Glover) ]、桃蚜 [Myzuspersicae(Sulzer) ]和萝卜蚜 [Lipaphiserysimi(Kaltenbach) ]。
- 罗素兰张圣经长孙东亭
- 关键词：辣椒蚜虫害虫
- 基因枪法介导GNA基因遗传转化甘蔗的研究被引量：8
- 2006年
- 目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚性愈伤组织,分别在G418、PPT和Hyg的选择压力下,筛选抗性植株,并进行分子杂交鉴定。结果:通过斑点杂交和PCR-Southern杂交证明GNA基因已整合到甘蔗基因组中。结论:用基因枪法成功获得了含有GNA基因的甘蔗转化株,为培育抗甘蔗绵蚜(Ceratovacuna lanigeraZehnther)的新品种提供了基础。
- 长孙东亭罗素兰陈如凯林皎月严建燕
- 关键词：甘蔗基因枪转化GNA基因
- 辣椒离体高效再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立被引量：39
- 2003年
- 选用辣椒(CapsicumannuumL.)4个品种的子叶以及下胚轴为外植体进行不定芽的诱导分化、生长及生根成苗试验.在组织培养的各个阶段的培养基中,附加不同种类及不同质量浓度的激素组合,观察测量外植体在各种培养基中的生长情况,从中筛选出最优的激素配比培养基,从而建立了辣椒的高效离体植株再生体系.在此基础上,将不同质量浓度梯度的卡那霉素(Kan)分别加入子叶、下胚轴愈伤组织诱导及不定芽分化阶段的培养基中,观测Kan对外植体生长的影响,以确定各阶段的最低致死质量浓度,用于辣椒的遗传转化研究.试验结果表明最佳的辣椒离体再生培养基为:芽分化阶段,MS+6-BA3.0mg·L-1+IAA0.1mg·L-1;不定芽伸长阶段,MS+GA32mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1;诱导生根,MS+IAA1.0mg·L-1.合适的Kan质量浓度为:下胚轴出愈为80mg·L-1;子叶分化出不定芽为60mg·L-1.
- 罗素兰王鹏程张转长孙东亭
- 关键词：高效再生体系辣椒培养基优化卡那霉素离体培养激素配比
- 重组GNA制剂的田间药效试验
- 2006年
- 本实验以在2个重组大肠杆菌菌株G2和G3中表达的雪花莲外源凝集素为原药,与2种表面活性剂丁二酸二仲异辛酯磺酸钠(PAT)和壬基酚聚环氧乙烷醚(NP10)配制成生物农药制剂,对田间玉米蚜虫进行防治.试验结果表明:重组菌株G2和G3生产的GNA与助剂PAT和NP10配合成的制剂,田间喷雾7 d后,对玉米蚜虫的防效均在90%以上,与化学杀虫剂吡虫啉相比,田间药效无显著差异,且具有持效期长的优点.
- 长孙东亭周冠宇陈少柯李嘉诚罗素兰
- 关键词：田间药效试验蚜虫表面活性剂
- 大肠杆菌中重组GNA蛋白的分离纯化被引量：9
- 2004年
- 具有特异结合甘露糖基的雪花莲外源凝集素 (Galanthusnivalisagglutinin,GNA)具有多种生物活性 ,在糖蛋白分离、逆转录病毒病和害虫防治等方面有广泛的应用价值。该试验分别采用超声破碎法、冻融裂解法和溶菌酶法破碎重组大肠杆菌细胞后 ,经尿素或SKL(十二烷基肌氨酸钠水溶液 )溶解后 ,再透析复性获得了在大肠杆菌 (E .coli)中高效表达的重组GNA蛋白 ,并经SDS -PAGE电泳检测GNA的大小、浓度及表达量。通过对诱导表达时间、超声处理的功率、时间、模式、尿素和SKL洗涤浓度 ,透析条件的优化组合 ,建立了一套从大肠杆菌细胞中分离重组GNA蛋白的有效方法 ,为进一步的重组GNA生物活性试验提供了物质基础。
- 罗素兰长孙东亭
- 关键词：大肠杆菌GNA蛋白纯化基因工程
- 重组雪花莲外源凝集素(GNA)表达条件的优化被引量：2
- 2005年
- 研究了含有GNA基因的重组大肠杆菌菌株G2和G3在不同诱导培养温度、起始诱导菌体密度(OD600值)、诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度及诱导培养时间等重要因子对重组GNA表达的影响,以期获得重组GNA表达的最佳条件.实验结果表明,不含信号肽的G2菌株和含有信号肽的G3菌株的最佳培养条件分别为:起始诱导菌体密度为OD600≈0.6;诱导剂IPTG浓度为0.1mmol/L;诱导培养时间为6 h;G2和G3的诱导培养温度分别为37℃,28～30℃.该研究结果将为发酵生产重组GNA的工艺提供依据,也为重组GNA开发成为生物农药、试剂和免疫增强剂提供支持.
- 罗素兰长孙东亭张真陈琴
- 关键词：温度大肠杆菌表达
- GNA成熟蛋白基因亚克隆及其原核表达载体构建被引量：3
- 2002年
- 雪花莲外源凝集素 (GNA)对刺吸式昆虫和某些咀嚼式昆虫以及多种线虫均有毒性。从含GNA前体蛋白基因的质粒中亚克隆出GNA的成熟蛋白基因MGNA ,将MGNA基因插入大肠杆菌表达载体pET2 2b的不同位点 ,再经测序验证 ,得到了三种不同表达形式的GNA原核表达载体 :2 2bG1 (分泌型融合GNA蛋白 )、2 2bG2 (包涵体型GNA蛋白 )、2 2bG3(分泌型天然GNA蛋白 ) ,这为进一步在大肠杆菌中表达GNA和将GNA制成生物农药奠定了基础。
- 罗素兰林俊芳陈如凯唐克轩郭丽琼
- 关键词：大肠杆菌亚克隆原核表达载体
- 高产透明质酸菌种FJ-23的诱变选育被引量：8
- 2006年
- 目的:高产透明质酸菌种的选育是提高透明质酸产量和质量的关键。方法:以马疫链球菌SH-0为出发菌,对其进行紫外诱变和NTG诱变选育。结果:筛选出溶血素和透明质酸酶双缺陷型突变菌株FJ-23,其透明质酸产量提高了7倍;突变株经6次传代,其产酸量及HA的相对分子量保持稳定,为今后进一步研究发酵法生产透明质酸打下基础。
- 冯建成张容鹄罗素兰
- 关键词：诱变选育
