国家自然科学基金(81001701)
- 作品数：8 被引量：50H指数：5
- 相关作者：梁磊邓虹珠郑堰心张丽彭娟更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院南方医科大学佛山市第二人民医院更多>>
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- 哈蟆油对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌的影响被引量：5
- 2013年
- 目的建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系,探讨哈蟆油含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖及分泌的影响,并分析和选择哈蟆油含药血清对颗粒细胞的最佳作用浓度,为进一步体外实验奠定基础。方法采用SD雌性大鼠,皮下注射孕马血清促性腺激素,剖取双侧卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,分离培养。将体积分数为15%,30%,60%,120%,240%(大鼠灌胃浓度4.5 g/kg)的含药血清5个终浓度分别加入培养体系中,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞增殖情况及药物的最大无毒浓度(TD0),观察其对卵巢颗粒细胞生长的影响。采用电化学发光法测定培养基中雌二醇(E2)的含量,分析哈蟆油含药血清对颗粒细胞雌激素分泌的影响。运用流式细胞术检测活细胞及凋亡细胞所占的比率。结果含药血清作用颗粒细胞后,呈现出不同程度的促增殖作用,含药血清最佳的作用浓度体积分数为15%～30%(大鼠灌胃哈蟆油剂量为4.5 g/kg)之间;哈蟆油含药血清可促进卵巢颗粒细胞分泌雌二醇,雌二醇含量分析显示雌二醇的分泌与细胞增殖情况存在正相关关系(Personr=0.406,P=0.01);流式细胞结果显示与空白含药血清比较,哈蟆油含药血清均能显著增加活细胞数目,抑制细胞无血清饥饿引发的凋亡(P值均小于0.01),起到细胞保护作用,其中体积分数为25%的含药血清作用效果更佳(P<0.01)。结论哈蟆油含药血清对离体培养的卵巢颗粒细胞增殖具有显著的促进作用,并存在一个最佳作用浓度范围,其调节机体性激素生成作用与促进卵巢颗粒细胞生长效应相关。
- 彭娟邓虹珠马丹丹魏蕾初郑堰心梁磊
- 关键词：哈蟆油卵巢颗粒细胞含药血清MTT法药物毒性
- 氧化苦参碱对人结肠癌SW620细胞p16/cyclinD1/CDK4通路的影响被引量：18
- 2014年
- 目的观察氧化苦参碱诱导人结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测氧化苦参碱对SW620细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测氧化苦参碱对SW620细胞凋亡的影响;流式细胞仪检测氧化苦参碱对SW620细胞周期的影响;实时定量PCR法检测细胞内p16、cyclinD1及CDK4基因表达水平;免疫印迹法检测细胞内p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达水平。结果氧化苦参碱抑制SW620细胞增殖作用呈剂量依赖性,其作用24 h的IC50为4.02μmol/L;与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G1期比例明显增高,G2期细胞比例下降(P<0.05);氧化苦参碱作用后SW620细胞p16基因和蛋白水平升高(P<0.05),cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论氧化苦参碱在体外能抑制SW620细胞的增殖,诱导细胞在G1期阻滞,其诱导作用与其调控p16、cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达有关。
- 张绪慧郑堰心张丽邓虹珠梁磊
- 关键词：氧化苦参碱SW620细胞P16CYCLIND1CDK4
- 正交试验优选易宁更年颗粒水提工艺及药效学对比被引量：5
- 2015年
- 目的优选易宁更年颗粒水提取工艺。方法 HPLC法测定特女贞苷,以特女贞苷量和浸膏得率为综合评价指标,通过正交试验优选药材浸泡时间、加水量与提取时间;采用免疫低下小鼠碳粒廓清功能作为工艺改变的药效评价指标,将优选工艺与原工艺进行比较。结果正交设计水提取优化结果为浸泡0.5 h,第1次加水量为10倍量,提取2 h,第2次加水为8倍量,提取1 h。原工艺与现工艺对免疫低下小鼠碳粒吞噬指数K和校正吞噬指数ɑ均有提高,且优选工艺对碳粒廓清功能增强更显著(P<0.05)。结论该工艺简单、易行,能够有效地提取女贞子中的特女贞苷,较原工艺能够更加有效地提高免疫低下小鼠碳粒廓清功能。
- 彭静陈志良梁磊邓虹珠易延逵
- 关键词：女贞子正交试验高效液相色谱法碳粒廓清
- 易宁更年颗粒对免疫低下模型小鼠的免疫调节作用被引量：1
- 2015年
- 目的:观察易宁更年颗粒对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:选用昆明种雌性小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺的方法建立小鼠免疫低下模型,分别观察不同剂量易宁更年颗粒对模型动物免疫器官脏器指数、脾淋巴细胞转化试验、血清溶血素水平以及NK细胞活性的影响。结果:对免疫低下小鼠,易宁更年颗粒能增加免疫低下小鼠胸腺指数,促进Con A诱导的脾淋巴细胞转化能力,提高血清溶血素水平和NK细胞活性。结论:易宁更年颗粒对免疫低下小鼠的细胞免疫和体液免疫具有保护作用。
- 彭静梁磊陈志良邓虹珠易延逵彭珊
- 关键词：免疫低下细胞免疫体液免疫
- 哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响
- 目的:探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠肝脏组织p16、p21和cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠机体衰老机制。方法SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生素...
- 姚晖姜晓刚梁磊梁颖黄志恩张继平邓虹珠
- 关键词：哈蟆油衰老肝脏D-半乳糖
- 文献传递
- 哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和细胞周期蛋白D1蛋白表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠肝脏组织p16、p21和细胞周期蛋白D1蛋白表达的影响,进一步探讨哈蟆油延缓雌性大鼠机体衰老机制。方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为D-半乳糖组、维生素E组、哈蟆油高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注射42 d,建立亚急性衰老模型。另取雌性青年大鼠8只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白对照组。第15天开始灌胃给药,给药时间28 d。给药结束后,免疫组化法检测衰老大鼠肝脏组织p16和p21蛋白的表达情况,蛋白免疫印迹法检测哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织细胞周期蛋白D1表达的影响。结果雌性衰老大鼠肝脏组织免疫组化结果表明,p16和p21多为胞浆表达,弥漫性、灶性分布均有。D-半乳糖组p16和p21阳性细胞积分与空白组比较升高,差异有显著性(P<0.01)。与D-半乳糖组相比,哈蟆油中、低剂量组,p16阳性细胞积分降低,差异有显著性(P值均<0.01),哈蟆油各剂量组p21阳性细胞积分降低,差异有显著性(P值均<0.01)。肝脏组织蛋白免疫印迹法结果表明,D-半乳糖组肝脏组织细胞周期蛋白D1蛋白表达与空白组比较降低,差异有显著性(P<0.01)。哈蟆油各剂量组细胞周期蛋白D1蛋白表达与D-半乳糖组比较,表达均升高(P值均<0.01),哈蟆油高剂量组尤为明显。结论哈蟆油可降低肝脏组织p16、p21蛋白的高表达。同时显著提高细胞增殖正性调控因子细胞周期蛋白D1蛋白的表达,促进衰老雌性大鼠肝细胞增殖。哈蟆油延缓雌性衰老作用可能通过调控肝脏p16,p21,细胞周期蛋白D1信号通路来促进有关增殖调控蛋白表达发挥延缓衰老作用。
- 姚晖邓虹珠张继平姜晓刚梁颖黄志恩梁磊
- 关键词：哈蟆油衰老肝脏D-半乳糖细胞周期
- 哈蟆油对雌性衰老大鼠子宫组织p16和cyclinD1蛋白表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16和正性调控因子cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠生殖器官衰老机制。方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生素E(VE组)、哈蟆油高剂量组(OR-H组)、中剂量组(OR-M)、低剂量组(OR-L组),每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注射42 d,建立亚急性衰老模型。另取雌性青年大鼠8只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组。第15天开始灌胃给药,给药时间28 d。给药结束后,免疫组化法检测衰老大鼠子宫组织p16和免疫印迹法检测cyclinD1蛋白的表达情况。结果雌性衰老大鼠子宫组织免疫组化结果表明,子宫组织p16阳性染色多为胞浆着色,见于子宫内膜、上皮细胞胞浆、子宫间质腺体腺上皮细胞胞浆,外膜上皮也有表达,弥漫性、灶性分布均有。D-gal组p16阳性细胞积分与空白组比较升高(P<0.01)。OR各剂量组与D-gal组相比,p16阳性细胞积分降低,差异有显著性(P均<0.01)。免疫印迹法结果表明D-gal组子宫组织cyclinD1蛋白表达与空白组比较降低,差异有显著性(P<0.01)。OR-H、M、L组cyclin D1蛋白表达与D-gal组比较,表达均升高(P值均<0.01),OR-H组尤为明显。结论应用OR可以减缓衰老子宫组织结构的损伤,改善衰老子宫萎缩和衰老程度,OR可降低雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16蛋白的高表达,同时显著提高细胞增殖正性调控因子cyclinD1蛋白的表达,促进衰老雌性大鼠子宫细胞增殖。哈蟆油延缓雌性生殖器官衰老作用可能通过调控子宫p16-cyclinD1信号通路来促进有关增殖调控蛋白表达发挥延缓衰老作用。
- 姚晖康秀兰彭荣芳黄志恩谢伟贤梁磊
- 关键词：哈蟆油衰老子宫P16
- 哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响
- 目的:探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠肝脏组织p16、p21和cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠机体衰老机制。方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生...
- 姚晖姜晓刚梁磊梁颖黄志恩张继平邓虹珠
- 关键词：哈蟆油衰老肝脏D-半乳糖
- 文献传递
- 哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗衰老能力的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:研究哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗衰老能力的影响。方法:SD雌性大鼠随机分组,老年对照组和青年对照组灌胃空白植物油,各给药组大鼠给予18g/kg、9 g/kg哈蟆油,连续给药6周,6周末各组大鼠腹主动脉采血分离血清,并取脑组织冰浴匀浆,检测血清、组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)的含量,以评价哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗氧化能力影响。结果:与老年对照组相比,哈蟆油高、低剂量组血清、脑匀浆SOD、GSH-Px活力显著升高,MDA、H2O2含量显著降低。结论:哈蟆油对自然衰老雌性大鼠具有提高抗氧化能力的作用。
- 马丹丹梁磊彭娟郑堰心刁建新邓虹珠
- 关键词：哈蟆油抗氧化
- 槐定碱、苦参碱和苦豆碱对LPS诱发结肠上皮细胞炎症模型中细胞因子IL-6和TNF-α水平的影响被引量：15
- 2014年
- 目的:构建结肠上皮细胞炎症模型,探讨槐定碱、苦参碱和苦豆碱对细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将细胞接种12孔板中,每孔接种肠上皮细胞株IEC-6 2×105个细胞。细菌脂多糖(LPS,1mg·L-1)干预生长良好的IEC-6细胞12 h,建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3种生物碱不同浓度对炎症细胞增殖的影响;ELISA法检测给药后细胞上清中IL-6,TNF-α的变化;免疫印迹法检测细胞内IL-6及TNF-α蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞上清中IL-6,TNF-α水平显著升高,LPS(1 mg·L-1)干预12 h后,IL-6,TNF-α含量分别为(1 899.68±45.80),(148.67±5.93)ng·L-1。苦豆碱、槐定碱和苦参碱均可有效减弱LPS诱导的结肠上皮细胞损伤。当生物碱浓度为100μmol·L-1时,槐定碱、苦参碱和苦豆碱均可提高LPS损伤细胞的活性,细胞存活率分别从80.47%提高为91.96%,92.40%,97.23%。此外,这3种生物碱可降低IL-6和TNF-α的含量及其在细胞内的表达。结论:槐定碱、苦参碱和苦豆碱3种生物碱均可通过降低IL-6和TNF-α活性发挥抗炎作用。其中,苦豆碱的抗炎作用最佳。
- 郑堰心张丽邓虹珠梁磊
- 关键词：槐定碱苦参碱苦豆碱结肠上皮细胞
