江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ11-0681)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：江莎侯加法周振雷邓益锋高强更多>>
- 相关机构：南京农业大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡骨钙素多克隆抗体及其间接竞争ELISA试剂盒的制备与应用被引量：2
- 2012年
- 为了建立鸡骨钙素间接竞争ELISA检测方法,使用原核表达的重组鸡骨钙素蛋白作为免疫原,免疫4只雄性新西兰大白兔,成功获得兔抗鸡骨钙素多克隆抗体。该抗体能用于Western-blot检测天然骨钙素。以天然提取的鸡骨钙素为包被抗原,葡聚糖A亲和纯化后的兔抗鸡骨钙素多克隆抗体为一抗建立ELISA反应。结果,最佳包被抗原浓度为0.5μg/mL,最佳抗体工作浓度为1∶10 000,标准品浓度在50～0.39ng/mL间,具有较好的线性关系,检测下限为0.34,批间变异系数和批内变异系数分别为10.6%和4%。使用制备的试剂盒测定30个鸡血清样本及其倍比稀释后的血清样本;结果,鸡血清骨钙素浓度为4.42～19.83ng/mL,稀释前与稀释后测定的血清样本浓度相关性r2=0.952。结果表明,制备的鸡骨钙素间接竞争ELISA试剂盒可用于定量检测鸡血清骨钙素含量。
- 江莎孟凡吴晓丹高强侯加法
- 关键词：骨钙素多克隆抗体ELISA
- 骨钙素——骨骼调节能量代谢的内分泌激素被引量：5
- 2012年
- 骨钙素(OC)是由骨骼成骨细胞分泌的一种特异性非胶原蛋白。血液中骨钙素包括完整的骨钙素、非羧基化骨钙素及骨钙素片段。骨钙素基因敲出小鼠显示,血液中非羧基化骨钙素可作用于β细胞、脂肪细胞及睾丸间质细胞,促进胰岛素,脂联素和睾酮的分泌,对能量代谢和雄性生殖起调节作用。临床数据也显示非羧基化的骨钙素与糖尿病、非酒精性脂肪肝等能量代谢病有密切的关系。这些研究表明,骨骼具有分泌激素、调节能量代谢的功能,拓展了传统的骨骼仅限于支持、运动、保护作用的理解。
- 江莎邓益锋周振雷侯加法
- 关键词：骨钙素内分泌激素能量代谢生殖
- 鸡骨钙素蛋白的原核表达及其生物学活性被引量：2
- 2013年
- 为获得具有生物活性的骨钙素蛋白,以鸡颅骨提取的总RNA为模板,RT-PCR法克隆鸡骨钙素成熟肽DNA,连接至原核表达载体pET-32a(+),构建表达质粒pET-32a(+)-rchOC。质粒转化Rosetta-gami(DE3)pLyS宿主菌,IPTG诱导表达含His标签的重组蛋白His-rchOC。肠激酶酶切去除融合蛋白中的His标签后获得重组骨钙素蛋白(rchOC)。通过与羟基磷灰石结合试验、MTT及PNPP法分析该蛋白生物学活性。结果显示:重组骨钙素蛋白能与羟基磷灰石结合,抑制成骨细胞中碱性磷酸酶的表达,但不影响成骨细胞的增殖。结论:经原核表达系统已成功获得鸡重组骨钙素蛋白,且该蛋白具有生物活性。
- 江莎张建鹏姚大伟马晓平侯加法
- 关键词：骨钙素
