广东省自然科学基金(S2011040000208)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：姚咏嫦陈晓峰周嘉安更多>>
- 相关机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 可抑制I型胶原表达的siRNA重组腺病毒的构建
- 2013年
- 滑膜间质干细胞(SMSCs)与其他来源的间质干细胞相比,具有更强的生长能力和更大的软骨分化潜力.但由于SMSCs固有地表达I型胶原,这将会大大损害再生软骨的整体质量.为解决此问题,文中首先设计了可抑制I型胶原表达的shRNA,并将其构建到腺病毒载体上.接着通过Pac I酶切反应,使重组腺病毒载体线性化并通过脂质体转染293细胞进行病毒包装.收集的病毒初液进行滴度测定后,再次通过293细胞进行病毒扩增,经过纯化后,最终获得高滴度重组腺病毒.将重组腺病毒分别感染成纤维细胞和成骨细胞,通过荧光显微镜观察,检测转染效率,利用实时定量PCR实验验证siRNA的干扰效果.实验结果表明,包装后的重组腺病毒具有高的转染效率,能成功编译siRNA,并具有抑制I型胶原表达的能力.
- 姚咏嫦周嘉安陈晓峰
- 关键词：腺病毒SIRNAI型胶原
