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棘托竹荪菌丝体培养基碳源、氮源、无机盐的筛选被引量：3: 2010年; 利用平板培养和试管斜面培养探讨影响棘托竹荪菌丝体培养的理化因子:碳源、氮源、无机盐。结果表明:棘托竹荪菌丝体在平板中和试管中对碳源、氮源、无机盐的利用情况是相似的;无论是平板中培养还是试管中培养,黄豆粉、硫酸铵、硝酸钾、Na+都能促进棘托竹荪菌丝体的生长,乳糖、蛋白胨、尿素都会阻碍菌丝体的生长。棘托竹荪对氮源的需求最高,其次是无机盐,而对碳源的需求不是很高。; 卢惠妮潘迎捷赵勇孙晓红; 关键词：棘托竹荪菌丝体碳源氮源无机盐

疏水网格滤膜技术检测食源性致病菌的研究进展被引量：6: 2010年; 疏水网格滤膜技术利用膜的疏水性黏附细菌细胞,通过膜的过滤作用截留细菌细胞,然后将膜进行选择性培养,达到检测鉴定待测菌的目的。主要概述了疏水网格滤膜技术的原理和特点,以及该技术与分子生物学技术、免疫学技术偶联在食源性致病菌检测中的应用。; 苏晨曦潘迎捷赵勇Vivian C.H.Wu孙晓红; 关键词：微生物学检测酶标抗体 DNA探针

上海市水产品中副溶血性弧菌的分离、鉴定及毒力基因和血清型分布被引量：27: 2011年; 为了了解上海市市售水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemoly ticus,Vp)污染状况和血清型,为防治Vp引起的食源性疾病提供依据。采用GB/T 4789.7-2008国标方法进行分离和生理生化鉴定,根据FDA推荐的引物对种特异性tlh基因和毒力基因(tdh,trh)进行PCR检测。从161份水产品中分离鉴定得到45株副溶血性弧菌,平均检出率为27.95%。通过PCR检测分离株的tdh和trh毒力基因发现,45株副溶血性弧菌均为trh阴性,7株为tdh阳性。45株副溶血性弧菌经血清凝集,结果共分出7个血清群,分别为O1群占2.2%(1/45),O3群占24.4%(11/45)、O4群占15.6%(7/45)、O5群占20.0%(9/45)、O9群占4.4%(2/45)、O10群占8.9%(4/45)、O11群占26.7%(12/45)。; 高玮潘迎捷赵勇卢瑛孙晓红; 关键词：水产品副溶血性弧菌毒力基因血清型

棘托竹荪子实体抑菌活性的研究被引量：18: 2009年; 以水为提取剂,对棘托竹荪子实体进行浸提,利用琼脂平板打孔法测定棘托竹荪子实体对大肠杆菌O157:H7、副溶血弧菌、单增李斯特菌、肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,并研究其对5种病原菌的最低抑菌浓度(MIC)、热稳定性以及抑菌pH值范围。结果表明,棘托竹荪子实体的浸提液对副溶血弧菌抑制作用最好,其次是单增李斯特菌、大肠杆菌O157,对肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌抑制效果最差;棘托竹荪子实体的浸提液最低抑菌浓度小,抑菌pH值范围广而且热稳定性强。; 卢惠妮潘迎捷孙晓红赵勇; 关键词：棘托竹荪子实体抑菌作用最低抑菌浓度

不同样品副溶血性弧菌多样性分析被引量：1: 2012年; 采用肠细菌基因外重复回文序列扩增(REP-PCR)和肠道细菌基因间重复序列扩增(ERIC-PCR)2种方法,对从3种不同样品中分离得到的副溶血性弧菌进行分型分析;通过REP和ERIC-PCR指纹图谱扩增,利用NT-SYS-pc软件,并采用Dice系数对指纹图谱进行聚类分析。结果显示:55株副溶血性弧菌REP-PCR指纹图聚谱共分为3大类,其中底泥中的优势谱型为Ⅰ类型,海水中的优势谱型为Ⅱ类型,虾样品中的优势谱型为Ⅰ类型;ERIC-PCR指纹谱型也聚类为3大类,在海水和底泥中的优势谱型均为Ⅰ类型,但底泥中副溶血性弧菌多样性较海水中丰富,虾样品中副溶血性弧菌优势谱型为Ⅱ类型。表明不同样品中副溶血性弧菌优势型不同,进而推测不同类型谱型的菌株耐冷特性不同。; 马月姣孙晓红赵勇卢瑛吴启华潘迎捷; 关键词：副溶血性弧菌

环介导恒温扩增技术可视化检测携带tdh基因的致病性副溶血性弧菌被引量：2: 2014年; 建立了环介导恒温扩增技术检测携带tdh基因的致病性副溶血性弧菌。基于副溶血性弧菌高度保守的tdh基因序列,设计了6条特异性引物,两条外引物F3、B3,两条内引物FIP、BIP及两条环引物LF、LB。在Bst DNA Polymerase作用下,60℃恒温水浴进行扩增。对10种细菌共21株菌进行LAMP扩增,所试6株副溶血性弧菌均为阳性,说明引物具有高度特异性。本LAMP方法对纯培养物的灵敏度可达到9.42cfu/m L。对污染食品中副溶血性弧菌的灵敏度为25.3cfu/25g,40～60min内即可完成检测。本方法操作简便、特异性强、灵敏度高,可以为临床提供简单、快速、高灵敏度和高特异性的检测应用。; 陈梅萍孙晓红姜文洁赵勇Vivian Chi-Hua Wu潘迎捷; 关键词：副溶血性弧菌 SYBR I

四种副溶血弧菌总RNA提取方法的比较被引量：5: 2009年; 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰氏阴性嗜盐菌。提取高质量的RNA是研究副溶血弧毒力基因表达与其致病性和环境适应性的基础。本研究分别用SDS法、Trizol法,PureLinkTM RNA Mini Kit和Uniq-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取六株副溶血弧菌的总RNA,用普通琼脂糖凝胶电泳和核酸测定仪检测RNA的质量,并用RT-PCR法对四种提取方法进行比较。研究结果表明,Trizol法和Pure-LinkTM RNA Mini Kit简单快捷,提取的总RNA完整性好,纯度高,可用于后续实验的分子生物学研究;而Trizol法更适用于普通实验室细菌RNA的提取。; 陈星潘迎捷孙晓红赵勇; 关键词：副溶血弧菌总RNA提取 SDS法 TRIZOL法试剂盒

REP-PCR及ERIC-PCR法对分离自海产品副溶血性弧菌分型分析被引量：10: 2013年; 目的:采用细菌基因外重复回文序列扩增(REP-PCR)和肠道细菌基因间重复序列扩增(ERIC-PCR)两种方法对副溶血性弧菌2株标准株,13株实验室保存菌株和73株分离菌株共88株进行分子分型。方法:通过REP和ERIC-PCR指纹图谱扩增,利用NTsys-pc软件采用Dice系数对指纹图谱进行聚类结果分析。结果:所有供试菌株可通过此两种方法进行分型得到清晰的指纹图谱,并反映出副溶血性弧菌具有丰富的遗传多样性,REP-PCR扩增出5～9条分布在609～4200bp之间的条带,可将副溶血性弧菌分为5个群12类型,分辨指数达0.93,其中tdh+株在相似系数0.86时可聚类在第Ⅰ群;ERIC-PCR扩增出5～11条分布在400～7593bp之间的条带,将副溶血性弧菌分为7个群11个类型,分辨指数为0.94,其中tdh+株在相似系数0.76时可聚类在第Ⅰ群。结论:两种方法均显现出很好的分型能力,能够很好地将环境分离tdh+菌株和标准菌株聚类在一起,其中REP-PCR较ERIC-PCR重复性更好。; 马月姣孙晓红赵勇卢瑛吴启华潘迎捷; 关键词：副溶血性弧菌 TDH

副溶血性弧菌免疫磁珠的制备及其应用被引量：9: 2012年; 研究比较了不同的免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMBs)富集捕获副溶血性弧菌的能力。采用两种副溶血性弧菌多克隆抗体,分别包被经羧基和甲苯磺酰胺基基团修饰的磁珠,制备完成5个免疫磁珠(IMB-C1、IMB-C2、IMB-T1、IMB-T2和IMB-T3)。研究引入表面抗体浓度作为评价免疫磁珠捕获能力的特征性参数,两种副溶血性弧菌多克隆抗血清包被的羧基磁珠表现出了较高的表面抗体结合能力,分别为34.25fg/μm2和36.73fg/μm2,明显高于甲苯磺酰胺基磁珠。五个免疫磁珠对副溶血性弧菌捕获能力的研究结果表明:在起始菌液浓度为4.32logCFU/mL时(p<0.05),两个羧基磁珠捕获率达到79%和94%,均优于甲苯磺酰胺基磁珠。采用环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术对免疫磁珠菌体细胞复合物进行体外扩增,结果表明:磁珠的存在并未影响对菌体细胞的后续分子检测。本研究分析比较了不同免疫磁珠的捕获能力,得到羧基磁珠对副溶血性弧菌的捕获能力比甲苯磺酰胺基磁珠强,直接法和间接法偶联方式对免疫磁珠的富集捕获能力无影响。; 苏晨曦孙晓红卢瑛赵勇Vivian C H Wu潘迎捷; 关键词：副溶血性弧菌免疫磁珠羧基

长裙竹荪和棘托竹荪碳源、氮源、无机盐的筛选被引量：5: 2010年; 目的:优化长裙竹荪和棘托竹荪的培养条件,建立长裙竹荪菌丝体和棘托竹荪菌丝体的最佳培养基。方法:本实验利用平板和试管斜面培养来探讨影响两种竹荪菌丝体培养的理化因子:碳源、氮源、无机盐。结果:两种菌丝体在平板和试管中对碳源和氮源的利用情况相似,但是它们对无机盐的利用却有些不同。以黄豆粉作为氮源时,两种菌丝体的长势最好,以乳糖作为碳源,以及蛋白胨和尿素作为氮源时,两种菌丝体长势最差。两种菌丝体对氮源需求最高,其次是Na+,最后是碳源。结论:初步建立长裙竹荪和棘托竹荪的培养方法。; 卢惠妮潘迎捷赵勇孙晓红; 关键词：长裙竹荪棘托竹荪菌丝体碳源氮源无机盐

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