吉林省科技发展计划基金(200705155)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
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- 子宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1+细胞的生物学特性被引量:1
- 2010年
- 目的 探讨宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1^+细胞的生物学特性.方法 采用细胞免疫荧光标记及流式细胞仪分选HeLa细胞中Bcrp1^+及Bcrp1^-细胞,透射电镜观察两种表型细胞的形态,倒置显微镜观察两种表型细胞培养不同时间(24、48、72 h)后的生长情况;采用流式细胞仪检测两种表型细胞的细胞周期及细胞凋亡情况;采用蛋白印迹法检测两种表型细胞中增殖周期相关蛋白--增殖细胞核抗原(PCNA)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况(结果均以"表达丰度"表示).结果 (1)分选结果显示,宫颈癌HeLa细胞中,Bcrp1^+细胞占7.1%,Bcrp1^-细胞占92.9%.透射电镜观察,与Bcrp1^-细胞相比较,Bcrp1^+细胞核大、核仁明显、胞质内线粒体丰富、粗面内质网增多.倒置显微镜观察,分选后的Bcrp1^+细胞迅速进入分裂状态,培养24 h即贴壁生长,而Bcrp1^-细胞培养48 h方有少量贴壁生长;培养24、48、72 h时,Bcrp1^+贴壁细胞分别占72.8%、81.1%、80.4%,Bcrp1^-贴壁细胞分别占3.3%、18.7%、12.6%,各个时间点两种表型细胞的贴壁细胞所占百分比分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05).(2)流式细胞仪检测显示,Bcrp1^+细胞中S期细胞比例(54.1%)和增殖指数(55.6%)均高于Bcrp1^-细胞中S期细胞比例(21.1%)和增殖指数(47.0%),差异均有统计学意义(P〈0.05);而Bcrp1^-细胞中G0/G1及G2/M期细胞比例(分别为53.0%、25.9%)均高于Bcrp1^+细胞(分别为44.4%、1.5%),差异均有统计学意义(P〈0.05).Bcrp1^+细胞的凋亡率为0.2%,Bcrp1^-细胞为5.3%,两者比较,差异有统计学意义(P〈0.05).(3)蛋白印迹法检测显示,在Bcrp1^+细胞中PCNA蛋白的表达水平(表达丰度为3140)高于Bcrp1^-细胞(表达丰度为2255),而caspase-3蛋白的表达水平(表达丰度为1970)低于Bcrp1^-细胞(表达丰度为3551),分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05).
- 张松灵于晓伟魏振佟付艳
- 关键词:HELA细胞肿瘤蛋白质类ATP结合匣式转运子肿瘤干细胞