北京市自然科学基金(7032005)
- 作品数：15 被引量：46H指数：5
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- 相关机构：首都医科大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金教育部“优秀青年教师资助计划”更多>>
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- 低氧对小鼠脑组织内MAPKs磷酸化水平的影响
- 丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)是一类存在于所有真核细胞内的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,它包括细胞外信号调节的蛋白激酶(ERK1,2,3,4和5)、应急激活的蛋白激酶(JNK1,2和3)和P38(P38α、β、γ和δ)...
- 李俊发李洪燕王一松韩松祖鹏宇
- 关键词：磷酸化水平大脑皮层小鼠脑组织MAPKS
- 文献传递
- 持续性低氧环境下人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C各亚型的膜转位现象(英文)
- 2005年
- 背景:蛋白激酶C家族有3组,经典型蛋白激酶C及非典型蛋白激酶C和新奇型蛋白激酶C。一些实验证实在低氧环境中,蛋白激酶C家族在脑缺血低氧预刺激中发挥了重要作用。目的:建立细胞缺氧模型,观察在细胞水平上低氧激活经典型蛋白激酶C各亚型(α,βⅠ,βⅡ,γ)膜转位现象的影响。设计:以细胞为对象,随机区组设计。单位:首都医科大学基础医学院神经生物学系。材料:实验于2004-05在首都医科大学神经生物学系细胞培养室完成。由本实验室培养的传代细胞,具有神经元特性的人神经母细胞瘤细胞系。方法:应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学等生化技术,观察培养的细胞经过0～24h不同时间段,低氧环境为体积分数0.01的氧气,体积分数0.05的二氧化碳,体积分数0.94的氮气,对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平的影响。主要观察指标:①观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析检测。②观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用免疫细胞化学方法检测。结果:①经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平均随持续性低氧时间的延长而明显增高(P<0.05),尤以经典型蛋白激酶C-βⅠ亚型在持续性低氧4h后的增高最为显著(P<0.001)。②无论在常氧还是在持续性低氧状态下,在人神经母细胞瘤细胞内均未检测到经典型蛋白激酶C-γ亚型的蛋白表达。应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学实验检测的结果均一致。结论:①在持续低氧的条件下存在于人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ亚�
- 祖鹏宇李俊发韩松曲彦明李华牛晨晨徐群渊
- 关键词：低氧蛋白激酶C
- 重复性低氧增高小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平
- 2006年
- 为探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用,本研究应用Westernblot技术结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测了整体低氧预适应模型小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平和非磷酸化水平的表达水平。结果显示:(1)随低氧暴露次数(H1H4)的增加,小鼠海马组织内CREB的磷酸化水平(激活程度)明显增高(P<0.05;n=7);同样,大脑皮层内CREB的磷酸化水平也随低氧暴露次数(H1H4)的增加而明显增高(P<0.05,n=7);(2)随低氧暴露次数(H1H4)的增加,CREB的蛋白表达量无论在小鼠海马组织还是皮层组织内均无明显变化。以上结果提示CREB磷酸化水平的增高(激活)可能参与了脑低氧预适应的形成过程。
- 高亚南高歌龙彩瑕牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词：脑低氧预适应CREB磷酸化大脑皮层
- 低氧对培养细胞内cPKCα膜转位的影响
- 被视为细胞内第三信使的蛋白激酶C(PKCs)是一类使底物蛋白分子内丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶家族,它由经典型(cPKC)、新奇型(nPKC)和非典型(aPKC)等三类11种亚型组成。PKCs不同亚型可使不同的底物...
- 祖鹏宇李俊发韩松
- 关键词：培养细胞
- 文献传递
- 蛋白激酶C在缺血/低氧预适应领域研究进展被引量：2
- 2004年
- 缺血/低氧预适应(ishaemic/hypoxic precomditioning,I/HPC)是一种内源性保护机制,即短暂、亚致死量的重复性缺血/低氧预刺激可引起组织或器官对继发严重低氧的耐受.这一预适应现象可发生在脑、心脏、肝、小肠、骨骼肌、肾脏和肺等器官系统.关于这一课题,尽管已有大量研究报道,并提出了一系列的可能机制,如谷氨酸和腺苷受体激活机制、ATP敏感K+-通道、一氧化氮、氧化应激和低温机制等,但到目前为止尚无一种公认的确切机制.
- 李俊发徐群渊
- 关键词：缺血低氧预适应蛋白激酶C腺苷受体预刺激器官系统
- 低氧对小鼠脑组织内cPKCγ和α膜转位的影响
- 蛋白激酶C(PKCs)是一类使底物蛋白分子内丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶家族,其包括经典型(cPKCα,βⅠ,βⅡ,γ)、新奇型(nPKCδ,ε,η,θ,μ)和非典型(aPKCζ,ι/λ)等三类11种亚型。尽管目前...
- 崔秀玉李俊发韩松祖鹏宇
- 关键词：小鼠脑组织
- 文献传递
- 蛋白激酶C在脑低氧预适应发生发展中的作用
- 近年关于缺血/低氧预适应(I/HPC)机制方面的研究已有大量报道,并提出了一系列的可能机制,但尚无一种公认的确切机制。有趣的是,无论那种机制,均涉及蛋白激酶C(PKCs)的激活及其引起的细胞内一系列的信号转导。然而,目前...
- 李俊发崔秀玉王雪梅祖鹏宇韩松
- 关键词：低氧预适应海马组织
- 文献传递
- OGD增加小鼠离体海马组织内cPKCβII和nPKCε的膜转位
- 2005年
- 目的:通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血/低氧预适应(I/HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。方法:急性分离小鼠海马组织、制备400!μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血/低氧刺激;应用SDS-PAGE和Westernbolt等生化技术,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。结果:OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(P<0.001,n=6)。结论:实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血/低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I/HPC模型的预处理刺激较为合理。
- 李华贾军韩松李俊发
- 关键词：脑低氧预适应膜转位海马脑片
- 低氧对小鼠脑组织内P38磷酸化水平的影响
- 作为丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)重要组成成员的P38,包括α,β,γ和δ等4种亚型,它们均可被高渗、细胞应激(紫外辐射、渗透性休克、心力衰竭、蛋白合成抑制剂)、细胞因子和G蛋白-偶联受体等激活。P38的作用底物主要是...
- 李俊发李洪燕祖鹏宇韩松
- 关键词：磷酸化水平小鼠脑组织P38
- 文献传递
- 重复低氧对小鼠脑内cPKCα和γ膜转位及蛋白表达的影响被引量：6
- 2005年
- 探讨cPKCs特定亚型在脑低氧预适应形成过程中的作用 ,借助已建立的小鼠整体低氧预适应模型 ,应用SDS PAGE和Westernblot等生化技术 ,并结合GelDoc成像系统 ,半定量检测脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平和蛋白表达量。结果发现 ,随低氧暴露次数 (低氧 2～ 4次 )增加 ,在小鼠海马和皮层组织内cPKCγ膜转位水平增高显著(P <0.0 5 ,n =6 ) ;然而 ,cPKCα的膜转位水平和cPKCγ及γ的蛋白表达量的变化均不显著。提示 。
- 牛晨晨李俊发徐群渊
- 关键词：PKCΓ蛋白表达小鼠脑内转位
