国家自然科学基金(30671700)
- 作品数：28 被引量：166H指数：6
- 相关作者：池玉杰于存闫洪波尹立伟郑苗苗更多>>
- 相关机构：东北林业大学齐齐哈尔大学安庆师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 灰树花的系统发育分析和主要木质素降解酶的测定被引量：15
- 2010年
- 对灰树花菌株迁西二号进行了ITS序列扩增与测序(GenBank登录号为GU584099),并对灰树花及相关白腐菌进行了基于ITS序列的系统发育分析,结果表明灰树花与Grifola sordulenta (Mont.) Singer等白腐菌的亲缘关系较近。采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加4种不同底物,对菌株迁西二号在25℃恒温下静置培养,得到了不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测了在470、420、310 nm处对于2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、3,4-二甲氧基苯甲醇/藜芦醇(VA)的氧化作用后光密度值的变化情况,作为锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Laccase)和木质素过氧化物酶(LiP)产生和活性大小的依据,从而获得了灰树花木质素降解酶系统的主要酶系及其与培养基的成分和酶作用底物的基本关系。结果表明,灰树花可产生MnP和漆酶,但不产生LiP;对比4种成分不同的培养液酶活力测定结果,未添加底物的培养液MnP最大酶活仅为2.96 U.L-1,漆酶最大酶活仅为4.49 U.L-1。添加底物木屑和2,6-DMP后MnP最大酶活为8.06 U.L-1,漆酶最大酶活为9.85 U.L-1,表明在培养液内添加酶的底物木屑后能轻微地提高两种酶的分泌量。
- 尹立伟池玉杰王雪童
- 关键词：灰树花ITS序列锰过氧化物酶漆酶
- 一色齿毛菌对活性染料的脱色研究被引量：10
- 2014年
- 为进一步鉴定试验菌株及明确一色齿毛菌CB1（Cerena unicolor CB1）对活性染料的脱色效果，在对该菌株ITS序列克隆的基础上，进行了其对活性黑和活性红2种活性染料脱色条件的研究。结果表明，C.unicolorCBl与17个同种其他菌株的ITS序列相似性为93％～99％，说明试验菌株为一色齿毛菌。染料脱色结果表明，250mg／L的活性黑对C．unicolorCBl的脱色产生明显的抑制，而500mg／L的活性红对该菌株的脱色抑制不明显。C．unicolorCBl对活性黑和活性红的脱色最适碳源分别是果糖和葡萄糖；最适氮源分别是尿素和硝酸铵；最适Cu^2＋和Mn^2＋添加浓度都为0．1mmol／L；最适pH为5；最适接种量为直径d=8mm的新鲜菌丝7片。
- 于存池玉杰
- 关键词：ITS序列活性染料脱色
- Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1基因启动子序列的克隆被引量：3
- 2012年
- 根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-92～-43 bp区域为Lg-mnp1启动子的基础启动子区;在-52 bp处有一个转录起始位点,-83 bp处有1个TATAAA-box,-119、-196 bp有2个反向CCAAT-box(ATTGG)。启动子区也存在多个顺式作用元件,包括转录因子SP-1(GGGCGG)、转录因子AP-2(CCCMNSSS)、热激元件HSE(NTTCNNGAAN)及6个推定的金属响应元件MRE(TGCRCNC)等。
- 吴书景池玉杰闫洪波
- 关键词：锰过氧化物酶启动子染色体步移
- 猴头菌菌株CB1的系统发育分析与木质素降解酶的检测被引量：2
- 2013年
- 首先对猴头菌菌株CB1进行培养特性观察,表明菌株能产生较多的厚垣孢子;对其ITS序列进行扩增(GenBank登录号为GU584100),并与猴头菌属5个种的17个不同地域菌株进行基于ITS序列的系统发育分析,结果表明菌株CB1与猴头菌同种其他菌株遗传距离较近并聚类在一起。明确该菌株的分类地位后,对其进行木质素降解酶系统的检测,结果表明猴头菌可产生锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(laccase),但不产生木质素过氧化物酶(LiP)。MnP和漆酶的酶活性变化是有规律的,Mn2+是猴头菌产生MnP的必要因子,而漆酶的产生则不受该条件的制约。在含Mn2+的LNAS培养基中加入木屑为底物的条件下,猴头菌MnP最大酶活性为45.56U·L-1,漆酶最大酶活性为61.85U·L-1。
- 尹立伟池玉杰
- 关键词：猴头菌ITS序列锰过氧化物酶
- 白灵菇木质素降解酶系的检测及其染料脱色能力的研究被引量：3
- 2014年
- [目的]明确白灵菇(Pleurotus ferulae)分泌木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Laccase)的规律,以及白灵菇染料脱色的能力。[方法]利用紫外可见分光光度计,检测4种培养方式下白灵菇木质素降解酶活性,并在此基础上进行了白灵菇对5种染料的脱色研究。[结果]4种培养方式下,可以检测到MnP和Laccase的活性,但并未检测到LiP。添加Mn2+和2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)对MnP和Laccase的产生有抑制作用,而添加青杨木屑可以将MnP的活性提高1.28倍,将Laccase的活性提高3.75倍;白灵菇对中性红和活性黑2种染料的最大脱色率分别为87.12%和86.13%,对活性红和刚果红的最大脱色率分别为45.91%和32.28%,而对结晶紫几乎无脱色能力。[结论]白灵菇产Laccace活性要高于MnP;与脱色活性红、刚果红、结晶紫相比,白灵菇对中性红和活性黑2种染料的脱色更为彻底。
- 于存徐红云池玉杰
- 关键词：白灵菇锰过氧化物酶漆酶木质素过氧化物酶染料脱色
- 偏肿革裥菌Lg-mnp2基因在构巢曲霉中的表达被引量：1
- 2014年
- 锰过氧化物酶（MnP；EC1．11．1．13）是真菌分泌的胞外过氧化物酶，广泛存在于木材白腐菌中，通常以多种同工酶的形式存在。MnP在生物修复和生物制浆领域具有重要作用，其可以降解土壤和废水中的DDT、多环芳烃、多氯联苯、含有苯环的偶氮与叠氮化合物，以及其他木质素结构。探索MnP基因的高效表达，目的是为提高其产量。
- 胡美美池玉杰
- 关键词：构巢曲霉
- 乳白耙齿菌菌株CB1对刚果红染料的脱色条件被引量：1
- 2016年
- 【目的】对从自然界得到的1株乳白耙齿菌菌株CB1(简称Il-CB1)进行系统发育分析与鉴定,并研究其对刚果红染料的脱色条件,以期为乳白耙齿菌在染料废水脱色中的应用提供依据。【方法】在形态学鉴定的基础上,克隆菌株Il-CB1的ITS序列并进行系统发育分析。采用单因素方法检测p H值、刚果红浓度、染料加入时间对Il-CB1脱色率的影响;基于正交试验检测碳源浓度、氮源浓度、Cu2+浓度、Mn2+浓度、接种量5个因素对Il-CB1脱色率的影响。【结果】菌株I1-CB1的ITS序列与其他不同来源的24个乳白耙齿菌的ITS序列归为一类,从而在分子水平上鉴定其为乳白耙齿菌。p H值对Il-CB1脱色刚果红的影响:脱色率随p H值增加先升高后降低,p H=3和8时脱色率均较低,其脱色刚果红的最适p H=6.0。刚果红浓度对Il-CB1脱色的影响:在液体条件下的脱色率随刚果红浓度的升高呈先升高后降低的趋势,对100 mg·L-1的刚果红脱色率最高,当继续升高染料浓度为250 mg·L-1时,脱色率明显下降,表明较低浓度的刚果红促进Il-CB1对其脱色,而高浓度的刚果红对Il-CB1脱色产生抑制。正交试验表明,Il-CB1对刚果红脱色的最优因素组合为:葡萄糖10 g·L-1、蛋白胨3 g·L-1、Cu2+和Mn2+的添加浓度均为0.2 mmol·L-1、在250 m L三角瓶中装液量为100 m L的条件下接种量为7 m L菌丝母液,在以上条件下第5天时染料脱色率高达99.60%。在上述所有培养条件优化的基础上,染料加入时间对Il-CB1脱色刚果红的影响:与0 h加入刚果红染料相比,在菌株培养3天后加入刚果红染料,其脱色时间明显缩短,初始脱色率就处于较高水平,在菌株培养3天时加入刚果红染料处理5天后的脱色率高达99.99%。【结论】菌株Il-CB1为乳白耙齿菌,其可有效降解刚果红染料,在染料废水降解中具有重要的应用潜能。
- 石亚攀池玉杰于存韩树英
- 关键词：ITS序列刚果红脱色
- 栗黑层孔菌产三萜条件优化与提取工艺被引量：3
- 2016年
- 【目的】研究菌株CY-2012菌丝体内三萜类物质的产生条件,以期得到最高量的三萜类物质。【方法】以28℃,150 r·min^(-1)作为初始培养条件,用基础培养基对采自长白山的栗黑层孔菌菌株CY-2012进行培养,然后采用2项单因子试验、1次4因素3水平的正交试验,对该菌株产三萜类物质的液体培养基成分进行优化;在此基础上,应用异丙醇和硫酸铵双水相萃取技术提取菌丝体内的三萜,采用2项单因子试验、1次3因素3水平的正交试验,对培养基成分优化后获得的菌丝体进行三萜类物质提取工艺研究。【结果】菌株CY-2012产三萜最优的培养基成分组合是:去皮马铃薯200 g·L^(-1)、葡萄糖25.0 g·L^(-1)、乳糖3.0 g·L^(-1)、酵母15.0 g·L^(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.5 g·L^(-1)、KH_2PO_40.5 g·L^(-1)、NH_4NO_30.3 g·L^(-1)、维生素B10.5 g·L^(-1),在28℃、150 r·min-1条件下培养10天菌丝干质量达0.769 g·(100 m L)-1,其中三萜类物质产量高达14.529 mg·(100 m L)-1,分别是初始培养条件下的9.96和35.52倍。双水相萃取技术最佳的提取工艺为异丙醇体积分数40%,硫酸铵质量浓度0.18 g·mL^(-1),室温浸提2 h,超声时间35 min,得到的三萜提取率为3.65%。【结论】通过优化培养基成分可以较大幅度地提高三萜的产量,优化异丙醇和硫酸铵双水相萃取提取工艺可以提高三萜提取率。
- 韩树英池玉杰
- 关键词：三萜化合物双水相体系
- 木材白腐菌分解木质素的酶系统-锰过氧化物酶、漆酶和木质素过氧化物酶催化分解木质素的机制被引量：72
- 2007年
- 近年来许多研究者进行了木材白腐菌分解木质素的酶系统对木质素的催化分解机制的研究.木材白腐菌在分解木质素的过程中会产生分解木质素的酶系统,氧化与分解木质素,这些酶系统主要包括细胞外过氧化物酶（锰过氧化物酶-MnP、木质素过氧化物酶-LiP）和细胞外酚氧化酶-漆酶（laccase）.
- 池玉杰伊洪伟
- 关键词：木质素过氧化物酶锰过氧化物酶酶系统漆酶酚氧化酶
- 偏肿革裥菌MnP基因在构巢曲霉中转化方法的建立被引量：2
- 2013年
- 对已经构建好的携带有白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)锰过氧化物酶完整编码序列基因的载体质粒pMDTM18-T/Lg-mnp、以及整合型表达载体质粒pLB01分别双酶切,然后进行连接构建了重组质粒pLB01/Lg-mnp。对构巢曲霉(Aspergillus nidulans)尿嘧啶尿苷营养缺陷体菌株TN02A7进行了制备分生孢子原生质体酶解方法的摸索。结果表明:将溶壁酶、纤维素酶和蜗牛酶3种酶以1∶1∶1的比例混合,能有效地使构巢曲霉的分生孢子形成原生质体。采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化方法成功地将L.gibbosa的MnP基因转入到了构巢曲霉中,获得了携带有白腐菌MnP基因的构巢曲霉转化子菌株。
- 胡美美池玉杰
- 关键词：锰过氧化物酶构巢曲霉原生质体
