国家教育部博士点基金(20041117005)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 应用IIF和PCR方法对病猪肺泡巨噬细胞PRRSV、PCV2的检测
- 2008年
- 对66份2004年10月至2005年8月患呼吸道疾病发病猪的肺组织进行PBS灌洗处理,获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM抹片,应用间接免疫荧光试验(IIF)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);同时提取PAMDNA作为模板,应用PCR方法检测猪圆环病毒2型。结果在66份PAM中,26份PRRSV阳性,23份PCV2阳性,其中8份同时检测出PRRSV和PCV2。以上结果表明,猪群中PRRSV和PCV2混合感染情况比较严重;应用IIF和PCR方法可以在PAM中检测PRRSV和PCV2。
- 李文杰叶俊平高崧刘秀梵
- 关键词：猪圆环病毒2型间接免疫荧光试验PCR方法
- 嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护被引量：4
- 2009年
- 应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒（PCV1—2）及真核表达质粒pcDNA3．1／V5-His-ORF2作为免疫原免疫母源抗体ELISA效价在0．07～0．60不等的商品猪，9头猪随机分为4组，1组（3头）肌肉注射免疫10^3.5 TCID50的PCV1-2／头，2组（2头）肌肉注射真核表达质粒200μg／头，3组（2头）肌肉注射空载体（pcDNA3．1）200μg／头，4组（2头）不免疫作为攻毒对照组。于免疫后42d，PCV1—2组及真核表达质粒组产生了PCV2抗体。免疫后42d所有组攻毒PCV2和PRRSV，剂量分别为2×10^4.5 TCID50／头和10^6 TCID50／头。攻毒后21d，攻毒对照组猪淋巴结比免疫组显著肿大，免疫组猪血清、淋巴结中PCV2病毒栽量低于对照组，攻毒对照组猪淋巴结中PCV2抗原含量高于免疫组。这些结果表明，嵌合型PCV1-2及真核表达质粒肌肉注射免疫商品猪后，对PCV2感染能产生保护性免疫应答，有可能成为候选疫苗。
- 程旭宋益盛瑜高崧刘秀梵
- 关键词：真核表达质粒免疫保护
- 江苏地区猪圆环病毒2型流行病学调查被引量：3
- 2008年
- 应用复合PCR方法，对江苏地区的162份可疑病料进行了检测，结果72份病料为PCV2阳性，17份为PCV1阳性，其中7份同时感染PCV1和PCV2。从发病时间看，以9～11月发病最多，阳性率高达54．67％。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26．03％和68．12％。通过流行病学调查，表明该病已在江苏地区呈流行趋势。同时对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行PCV2检测，结果有7头PCV2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV2；在这些脏器中，肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100％，较其他受检脏器更适合作为PCV2的检测样品。
- 李文杰刘金彪高崧刘秀梵
- 关键词：猪圆环病毒2型流行病学复合PCR
- 江苏地区猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查
- 应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2。从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的...
- 李文杰高崧刘秀梵
- 关键词：流行病学
- 文献传递
- 嵌合型猪圆环病毒1-2型感染性DNA克隆的构建及其对小鼠的免疫原性被引量：7
- 2008年
- 【目的】本研究旨在构建嵌合型猪圆环病毒1-2型感染性DNA克隆。【方法】利用PCR技术扩增PCV2 ORF2,克隆入缺失PCV1 ORF2的pSK-PCV1△ORF2中,得到pSK-sPCV1-2。该重组质粒中包含嵌合型PCV1-2全基因组,通过不完全酶切的方法,将嵌合型PCV1-2全基因组串联入pSK载体中,得到含串联双拷贝的嵌合型PCV1-2感染性DNA克隆。【结果】经序列测定,获得含串联双拷贝的嵌合型PCV1-2感染性DNA克隆。PCV1-2嵌合病毒接种BALB/c小鼠,用间接ELISA方法对接种后7、14、21、28、35、42d的小鼠进行血清抗体检测。结果显示从接种后14d开始,即有部分小鼠产生了针对PCV2Cap蛋白的特异性抗体;至接种后42d,几乎全部接种小鼠的血清均呈阳性。【结论】构建了PCV1-2型感染性DNA克隆,该嵌合病毒能够激发机体产生体液免疫应答。
- 宋益朱丽娜高崧刘秀梵
- 关键词：PCV1PCV2ORF2基因
