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天津市应用基础与前沿技术研究计划(07JCZDJC07300)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
葛林
赵虹
朱梦瑜
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钱宝鑫
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相关机构:
天津医科大学
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发文基金:
天津市应用基础与前沿技术研究计划
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年份
1篇
2011
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重组真核质粒pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1~5)的构建及表达
被引量:3
2011年
目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain(1~5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法:以重组质粒pEGFP-C1-G3BP为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目的片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1~5)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况。结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达。结论:重组pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1~5)质粒成功构建并表达。
朱梦瑜
高星杰
钱宝鑫
葛林
赵虹
赵秀娟
杨洁
关键词:
绿色荧光蛋白质类
质粒
重组融合蛋白质类
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