吉林省科技发展计划基金(200705420)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PCR点突变改造人透明带蛋白3酵母表达载体
- 2010年
- 目的:构建人透明带蛋白3的186位氨基酸突变体重组质粒并鉴定。方法:通过PCR点突变改造人透明带蛋白3的Kex2位点,构建pPICZα-hZP3186S突变载体。结果:经DNA测序表明,ZP3基因的556～558bp处碱基由AGG突变为TCC,读码框正确。结论:成功构建了pPICZα-hZP3186S突变载体(186位精氨酸突变为丝氨酸),为重组人ZP3蛋白在毕赤酵母能够分泌性表达奠定基础。
- 王弘珺李质馨徐冶田洪艳朱辛为潘晓燕窦肇华
- 关键词：透明带点突变PCR毕赤酵母
- 人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
- 2010年
- 目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23～348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23～348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3186S蛋白。结果:pPICZα-hZP3186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达。结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3186S蛋白(23～348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料。
- 王弘駂李质馨田洪艳徐冶朱辛为林冬静窦肇华
- 关键词：透明带毕赤酵母基因表达
- 人透明带蛋白3真核表达载体的构建
- 2011年
- 目的构建人ZP3蛋白(从第23位到348位氨基酸)真核表达载体,用于在毕赤酵母中表达重组人ZP3蛋白。方法通过PCR方法扩增编码人ZP3蛋白的基因,并将其克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ构建真核表达质粒pPICZα-hZP3。结果经PCR扩增获得的hZP3基因大小为978 bp,其DNA测序结果分析表明:pPICZα-hZP3质粒上的基因片段与已知发表在Genbank上的人ZP3 cDNA序列一致。结论成功构建了含有人ZP3基因的真核表达载体pPICZα-hZP3。
- 王弘珺李质馨田洪艳徐冶朱辛为林冬静窦肇华
- 关键词：毕赤酵母
