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国家高技术研究发展计划(2006AA10A2041)

作品数:3 被引量:13H指数:2
相关作者:蔺芳刘湘涛才学鹏刘艳红尚佑军更多>>
相关机构:中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学

主题

  • 2篇病毒
  • 1篇血清
  • 1篇血清抗体
  • 1篇疫病
  • 1篇体检
  • 1篇猪瘟
  • 1篇猪瘟病
  • 1篇猪瘟病毒
  • 1篇瘟病毒
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体检测
  • 1篇可溶性
  • 1篇可溶性表达
  • 1篇口蹄疫
  • 1篇口蹄疫病毒
  • 1篇昆虫细胞
  • 1篇间接ELIS...
  • 1篇杆状
  • 1篇杆状病毒
  • 1篇NS5B

机构

  • 2篇中国农业科学...
  • 1篇甘肃农业大学

作者

  • 1篇尹双辉
  • 1篇尚佑军
  • 1篇曹轶梅
  • 1篇刘在新
  • 1篇刘艳红
  • 1篇才学鹏
  • 1篇刘湘涛
  • 1篇卢曾军
  • 1篇魏彦明
  • 1篇孙甲川
  • 1篇蔺芳

传媒

  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇甘肃农业大学...
  • 1篇Animal...

年份

  • 1篇2010
  • 2篇2009
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
口蹄疫病毒VP31基因在昆虫细胞中的表达
2009年
研究了口蹄疫病毒(FMDV)VP31基因在昆虫细胞中的表达.结果表明:利用重组杆状病毒在昆虫细胞中成功表达了AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP31基因,目的基因经亚克隆插入到含有一段蜂毒溶血肽序列的转移载体pMelBac B中,构建出穿梭质粒pMel-VP31.将含有目的基因的穿梭载体与线性化的杆状病毒骨架共转染昆虫Sf9细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.重组病毒经扩增后感染Sf9细胞,用Western-blot和间接夹心ELISA检测,证实VP31蛋白获得了表达.
孙甲川曹轶梅卢曾军刘在新魏彦明
关键词:口蹄疫病毒杆状病毒
Discrepancy of Classical Swine Fever Virus in Different Tissues by One-Step RT-PCR and Nested RT-PCR被引量:3
2010年
Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for the detection of classical swine fever virus (CSFV) in blood and tissue samples of field cases and experimentally inoculated pigs. The distribution of CSFV in different organ samples showed some discrepancies in infected pigs. Four weaner pigs were inoculated with C-strain vaccine virus, then samples of spleen, tonsil, lung, mesenteric lymph node, kidney and brain were collected after slaughter and tested for E2 and NS5B genes using one-step RT-PCR and nested RT-PCR. Using the same method, 12 field cases were simultaneously studied. A discrepancy of CSFV in different samples was found upon detecting the target gene. The most reliable diagnostic organs were spleen and tonsil, and the nested RT-PCR assay provided a highly sensitive and specific method with comparable performance to the one-step RT-PCR assay.
YIN Shuang-huiTIAN HongSHANG You-junYANG Shun-liWU Jin-yanLIU Xiang-tao
关键词:TISSUESRT-PCR
可溶性E2蛋白作为抗原的检测猪瘟病毒血清抗体间接ELISA方法的建立被引量:10
2009年
以可溶性重组E2蛋白作为抗原,建立了猪瘟病毒(CSFV)血清抗体间接ELISA诊断方法(rE2-ELISA)。将猪瘟疫苗毒株E2基因主要抗原区(A-D)基因克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至20℃,获得48 000大小E2融合蛋白,部分目的蛋白以可溶性形式表达。Western blotting试验证实,E2融合蛋白可以和CSFV阳性血清发生特异性结合。亲和层析纯化后的E2融合蛋白作为抗原,建立了检测CSFV血清抗体的间接rE2-ELISA方法。该方法的特异性试验结果表明,与PRRSV、PCV2、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rE2-ELISA和国外同类试剂盒(CSF-Ab-Kit)检测142份田间血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为83.81%和88.73%。因此,rE2-ELISA猪瘟抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合应用在大规模的CSFV血清抗体的检测工作中。
尹双辉尚佑军刘艳红蔺芳才学鹏刘湘涛
关键词:猪瘟病毒可溶性表达抗体检测
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