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Stra8基因启动子逆转录病毒包装细胞株的建立: 2011年; 目的建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达（Pstra8-EGFP）的逆转录病毒包装细胞株，以方便地将Pstra8-EGFP转导到目的细胞，为生殖细胞鉴定分选提供基础。方法PCR扩增小鼠基因组DNA中的Stra8基因启动子片段，构建Stra8基因启动子控制表达的EGFP报告基因逆转录病毒质粒。将质粒脂质体法转染PT67病毒包装细胞，G418抗性筛选后，梯度稀释法将包装细胞单克隆化并扩增成多个细胞株。以包装细胞培养上清液感染NIH3T3细胞的所形成的G418抗性阳性细胞数定义病毒滴度，确定高滴度病毒包装细胞株。通过染毒小鼠骨髓间充质干细胞（mouse bone marrow mesenchymal stemcells，MSCs）验证该细胞株的Pstras8-EGFP转导效果。结果所建立的病毒包装细胞株培养上清液滴度达到1．3×10^6 cfu／ml。MSC经包装细胞培养上清液感染后，在（retinoicacid，RA）诱导下能表达EGFP蛋白。结论成功构建了将Pstras．EGFP转导到目的细胞的PT67逆转录病毒包装细胞株。; 漆正宇崔光辉郭新秦洁张艳敏桂耀庭蔡志明; 关键词：视黄酸间充质干细胞生殖细胞

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广东省医学科学技术研究基金(B2009230A2008634)