教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-10-0647)
- 作品数：28 被引量：181H指数：8
- 相关作者：杨军郭睿李宗芳黄小钟康安静更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学武汉大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程水利工程农业科学更多>>
- 蛋白表达的亚细胞定位影响基因免疫诱导的体液免疫应答水平的研究
- 2012年
- 目的研究表达产物的不同亚细胞定位对基因免疫诱导的体液免疫应答水平的影响,为基因疫苗的设计提供参考。方法利用分子克隆技术,分别构建能表达不同细胞定位的EGFP-HPVl6L1融合蛋白和截短型EGFP-HPV16L1△NLS融合蛋白的重组pcDNA-EGFP-HPV16L1和pcDNA-EGFPHPV16L1△NLS真核表达载体;通过转染CHO细胞,并在倒置荧光显微镜下观察表达产物的细胞定位;用重组pcDNA载体免疫BALB/c小鼠;EGFP作为抗原,ELISA法检测血清抗体吸光度。结果①重组pcDNA-EGFP-HPV16L1转染的CHO细胞核内可见到绿色荧光,pcDNA-EGFP-HPV16L1△NLS真核表达载体转染的CHO细胞质内可见到绿色荧光:②两种不同的重组pcDNA载体均可诱导BALB/c小鼠体液免疫反应,但重组pcDNA-EGFP-HPV16L1△NLS真核表达载体免疫组小鼠IgG抗体A_(450)值显著高于重组pcDNAEGFP-HPV16L1真核表达载体免疫组小鼠IgG抗体A_(450)值(P<0.001)。结论表达产物的不同细胞定位可影响基因免疫诱发的体液免疫应答水平,定位于细胞质内的蛋白分子较定位于细胞核的蛋白分子能诱导机体更强的体液免疫反应,这为以增强体液免疫反应为目的的基因疫苗的设计提供了参考。
- 杨军陈晓黎王一理司履生
- 关键词：抗体生成核定位信号基因免疫
- 免疫组织化学检测结果判读进展被引量：46
- 2014年
- 免疫组织化学(IHC)是病理学诊断、鉴别诊断及特异性分子靶标筛选、鉴定的最重要技术手段之一,也是肿瘤个体化治疗相关靶标检测的基础性平台技术。但自IHC应用以来,尽管已有多种IHC判读标准和方法,但由于分级标准差异大和主观性强以及对IHC结果准确性和精细化要求的提升,现有IHC结果判读标准已不能满足临床工作的需要。为此,该文拟在现有基础上,总结分析一种新的IHC结果判读标准和方法,以期为实现IHC的标准化提供参考。
- 杨军康安静苏宝山陈晓黎
- 关键词：免疫组织化学免疫表型分型判读方法
- 胸苷酸合成酶免疫组化染色在标记前列腺基底细胞中的应用被引量：5
- 2019年
- 目的评估胸苷酸合成酶(thymidylate systhase,TS)作为前列腺基底细胞分子标志的敏感性和特异性及其在前列腺癌诊断中的临床价值。方法应用免疫组化En Vision法检测TS、P63、CK-H(抗体克隆号:34βE12)、P504S在108例前列腺组织样本中的表达,其中正常和前列腺增生样本27例、前列腺非典型上皮内瘤变样本18例、前列腺腺癌样本63例,并比较TS与前列腺基底细胞特异性标志物P63、CK-H之间的一致性。结果 TS能特异性地高表达于前列腺基底细胞胞核内,且其表达模式和强度与P63的表达完全一致,CK-H在基底细胞胞质中呈强阳性表达。统计学分析结果显示,TS在前列腺基底细胞中的表达与P63和CK-H具有高度一致性(Kappa≥0. 75),而且,TS作为前列腺基底细胞分子标志的特异性和敏感性均为100%。同时,TS在3例(16. 7%)前列腺上皮内瘤变样本中弱阳性表达于腺泡细胞胞质内,TS在25例(39. 7%)前列腺腺癌细胞胞质内呈不同强度阳性表达。P63和CK-H在前列腺腺泡细胞和腺癌细胞胞质中不表达。P504S在前列腺腺癌细胞质中呈强阳性表达。结论胸苷酸合成酶能特异性表达于前列腺基底细胞核内,因而,可作为一种新的前列腺基底细胞的特异性分子标志而用于前列腺良恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断。
- 郭睿田怡金雪媛黄莺强磊黄小钟杨军
- 关键词：胸苷酸合成酶前列腺癌基底细胞分子标志物免疫组化
- P16INK4a蛋白在结直肠癌中表达及临床意义被引量：7
- 2016年
- 目的探讨P16INK4a蛋白在结直肠癌中表达情况及临床意义。方法结直肠癌患者64例,手术切除组织标本行免疫组织化学检查,观察P16INK4a蛋白表达情况,分析P16INK4a蛋白表达与临床病理特征间的关系。结果P16INK4a蛋白阴性表达12例(18.75%)、弱阳性表达4例(6.25%)、阳性表达25例(39.06%)、强阳性表达23例(35.94%),48例表达上调(75.00%);P16INK4a蛋白表达上调比例在男性(70.00%)与女性(79.41%)、高分化癌(71.74%)与低分化癌(83.33%)、临床分期≤Ⅰ期(84.62%)与临床分期≥Ⅱ期(72.55%)上差异无统计学意义(P>0.05),在无淋巴结或远处转移(88.89%)与有淋巴结或远处转移(57.14%)上差异有统计学意义(P<0.05)。结论P16INK4a蛋白表达上调是结直肠癌的重要免疫表型特征,且无淋巴结或远处转移者表达高于有淋巴结或远处转移者,可作为结直肠癌诊断及转移能力评估的重要分子靶标。
- 黄小钟郭睿黄莺康安静李宗芳杨军
- 关键词：结直肠癌P16INK4A蛋白免疫组织化学
- CD47、CD68和CD163在胃癌组织中表达的临床意义被引量：4
- 2021年
- 目的研究CD47在胃癌组织免疫微环境中的表达和浸润CD68^(+)TAMs(CD68 positive tumor-associated macrophages)和CD163^(+)TAMs(CD163 positive tumor-associated macrophages)的分布特征。方法采用免疫组化法检测CD47、CD68、CD163在78例胃癌组织样本中的表达,观察CD47的表达,计算肿瘤微环境中浸润CD68^(+)TAMs和CD163^(+)TAMs的分级,采用配对卡方检验进行统计分析。结果免疫组化染色显示CD47呈质膜型表达,在胃癌细胞和胃癌间质细胞中的表达明显强于其在癌旁胃黏膜腺体上皮细胞和间质细胞中的表达水平(P<0.05),且与淋巴结转移密切相关;同时,胃癌组织中浸润CD68^(+)TAMs和CD163^(+)TAMs的分级显著高于癌旁组织(P<0.01),但CD163/CD68比值在胃癌组织与癌旁组织中比较无差异。结论胃癌组织中CD47的高表达和CD68^(+)TAMs和CD163^(+)TAMs的浸润是胃癌的共性免疫微环境特征。
- 聂尊珍郭英陈佳田怡杨军
- 关键词：胃癌免疫微环境肿瘤相关巨噬细胞
- P16^INK4a蛋白表达调控机制及免疫组化染色结果判读被引量：4
- 2018年
- 由CDKN2A基因(p16基因)编码的P16^INK4a(简称P16),又称CAKN2A(cyclin-dependent kinaseinhibitor 2A),MTS-1 (multiple tumor suppressor 1),INK4A(inhibitor of CDK4)等,是细胞周期G1/S期检查点(check point)的负性调节因子和重要的抑癌基因。P16-CDK4/6-cyclin D-pRb 通路调控异常则是引起G1/S转换导致肿瘤细胞过度增殖的重要机制。既往认为,编码P16INK4a 蛋白的CDKN2A基因的纯合性缺失(homozygous deletion)、杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)、点突变(point mutation)和启动子超甲基化(promoter hypermethylation)是肿瘤细胞周期异常的主要机制[1,2]。
- 郭睿李宗芳杨军
- 关键词：免疫组织化学染色
- 地尔硫卓上调异黏蛋白在肝癌细胞中的表达
- 2019年
- 目的研究钙离子通道抑制剂逆转肝癌细胞多药耐药和对异黏蛋白表达的影响及分子机制。方法采用不同浓度钙离子抑制剂(0、25、50、100、200、400μmol/L)干预肝癌MHCC97H、7402细胞不同时间(12、24、48 h)后,用体外细胞划痕实验检测处理后肝癌细胞运动迁徙能力;采用RT-PCR和免疫细胞化学技术检测钙离子抑制剂对肝癌细胞中P-gp和异黏蛋白的表达的影响。结果钙离子抑制剂能够一过性抑制肝癌MHCC97H、7402细胞的迁徙运动能力,且具有一定的时间和浓度依赖性特点(P<0.05)。同时,不同浓度钙离子抑制剂盐酸地尔硫卓均能一过性上调肝癌MHCC97H、7402细胞中异黏蛋白mRNA和蛋白的表达(P<0.05),但并不抑制P-gp蛋白的表达。结论钙离子抑制剂地尔硫卓能一过性抑制MHCC97H、7402肝癌细胞的迁徙运动,并能反馈性上调促癌基因异黏蛋白mRNA和蛋白的表达水平。因而,采用钙离子抑制剂很可能具有增加肿瘤进展的潜在风险。
- 郭睿金雪媛田怡黄小钟李宗芳杨军
- 关键词：多药耐药地尔硫卓
- 基于CFD技术的双吸式离心泵转轮副叶片优化被引量：6
- 2012年
- 应用Fluent软件,基于RNG k-ε湍流模型和欧拉-拉格朗日多相流模型,对双吸式离心泵内的水流和泥沙颗粒运动进行了模拟,分析了不同长度、不同相对位置的副叶片对口环保护和水泵效率的影响.结果表明:选择的模型可准确地模拟双吸式离心泵内部流场和口环部位泥沙质量浓度,口环附近流速较低,对泥沙颗粒的挟带能力较弱,造成口环附近泥沙质量浓度远远高于水中平均泥沙质量浓度,导致了口环处快速磨损;缩短副叶片长度,能有效减小水泵装置效率的降幅,副叶片长度为1/4叶片长度时,靠近口环区域水流的相对速度的径向分量比较小,副叶片不能有效减小泥沙对口环的磨损;副叶片数由4减为3时,水流的挟沙能力得以保持,对口环的保护效果仍然明显,同时还能有效减小水泵装置效率的降幅;通过对比分析,方案7中的副叶片既能减小泥沙对口环的磨损,还能有效地减小由于副叶片的存在导致的圆盘摩擦损失,因此,选择方案7为最终优选方案.
- 钱忠东郜元勇谢华王志远
- 关键词：双吸式离心泵泥沙磨损数值模拟
- 灯泡贯流式水轮机全流道压力脉动数值模拟被引量：22
- 2014年
- 采用大涡模拟方法对灯泡贯流式水轮机全流道非定常湍流进行数值模拟,分析了额定工况和小流量工况下的压力脉动特征。计算结果表明:额定工况下,导叶前后、转轮出口的压力脉动主频为叶片频率,振幅最大值出现在转轮出口,尾水管内的压力脉动主频为转轮的转动频率,幅值相对较小;小流量工况下转轮出口产生偏心涡带,涡带旋转导致尾水管内产生低频压力脉动,低频压力脉动由尾水管向上游传递,幅值逐渐减小;额定工况下叶片上监测点的压力脉动频率为转轮转动频率的整数倍,幅值较小;小流量工况下,叶片上监测的点压力脉动幅值显著增大,脉动主频与次主频之和约为转轮的转动频率。
- 钱忠东魏巍冯晓波
- 关键词：水力机械贯流式水轮机压力脉动数值模拟
- TMEM 16A在胃腺癌中的表达及意义被引量：9
- 2012年
- 目的探讨Ca2+激活的氯离子通道(CaCC)蛋白TMEM16A在胃癌中的表达和意义。方法收集72例胃癌标本,采用免疫组织化学SP法检测TMEM16A的表达,以癌旁胃粘膜组织和非肿瘤胃粘膜组织作为对照,胃间质瘤组织作为阳性对照。结果TMEM16A表达于胃癌细胞胞膜和胞质内,在72例胃癌中TMEM16A呈不同程度阳性表达,在胃癌组织中TMEM16A表达的总阳性率("阳性"和"强阳性")为80.56%(58/72);而在相应的癌旁组织中TMEM16A表达的总阳性率("阳性"和"强阳性")仅为4.17%(3/72),两者之间差异显著(P<0.005)。结论 TMEM16A高表达于胃癌组织,可作为胃癌的分子诊断和靶向治疗的一个新的候选靶点。
- 杨军刘妮康安静靳耀锋王军宁苏宝山陈晓黎李宗芳
- 关键词：胃癌免疫组织化学
