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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-070615)
作品数:
1
被引量:5
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2009
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反义miR-221/222上调p27kp1对胶质母细胞瘤U251的放射增敏作用
被引量:5
2009年
目的探讨敲低微小RNA(microRNA,miRs)-221/222表达上调p27kp1对U251胶质母细胞瘤细胞系放射敏感性的影响。方法经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kp1的关系。脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)下调U251胶质母细胞瘤细胞系miR-221与miR-222的表达。使用Northern印迹方法鉴定转染后u251细胞miR-221、miR-222表达水平下调;流式细胞术检测转染后U251联合X线照射的细胞周期分布;克隆形成实验验证各组细胞增殖性死亡;Western印迹分析p27kp1蛋白的表达变化。结果经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27kp1是miR-221/222的靶基因。Northern印迹分析显示反义miR221/222共转染组使miR-221/miR-222的表达水平明显下降。转染无义序列组及对照组的miR-221/miR-222表达水平没有改变。流式细胞术检测可见反义miR-221/222共转染组细胞周期阻滞于G0/G1期且明显高于其它各组。经X线照射后,可明显降低S期比例。反义miR-221/222联合X线照射可增加U251细胞增殖性死亡。Western印迹分析显示反义miR-221/ee2共转染组的p27kp1蛋白表达明显上调。结论反义miR-221/222通过上调p27kp1蛋白表达可增加U251胶质母细胞瘤细胞系的放射敏感性。
张春智
王广秀
康春生
杜汋
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